山楂葉黃酮的提取、純化及分離技術(shù)研究.pdf

1、山楂葉是山楂屬植物的葉片，作為傳統(tǒng)中藥材具有悠久的藥用歷史，其藥用價(jià)值在于具有抗氧化、抗衰老、抗癌、抑菌、消炎、降血糖血壓、預(yù)防心血管疾病等功效。山楂葉中的豐富活性物質(zhì)，如黃酮類化合物及多糖，均是其主要的藥理成分，因此，提取山楂葉中的活性成分，能夠?qū)崿F(xiàn)山楂葉的高值化利用，提高其利用價(jià)值。研究山楂葉有效成分的提取、純化工藝，對于開發(fā)新型保健食品、藥品及化妝品、提高農(nóng)民收入具有重要的社會(huì)意義和現(xiàn)實(shí)意義。
　　本文以干燥山楂葉為原料，研

2、究了山楂葉成分的提取、純化及分離技術(shù)，其主要研究結(jié)果如下：
　　1.山楂葉最佳采收期前期確定，通過比較不同采收期山楂葉中的黃酮、多糖、蛋白質(zhì)及水浸出物的含量變化，確定山楂葉的最佳采收期為11月初。
　　2.通過單因素實(shí)驗(yàn)及正交實(shí)驗(yàn)確定直接水提法提取山楂葉黃酮的最佳提取工藝條件：料液比1:35，浸提時(shí)間60 min，浸提溫度60℃，溶液pH3.6，提取次數(shù)3次，在此條件下，黃酮的提取率為69.17±0.59％。
　　3.

3、以水為介質(zhì)，采用微波?超聲波聯(lián)合輔助提取法提取山楂葉黃酮，在單因素實(shí)驗(yàn)及PB實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以黃酮提取率為響應(yīng)值，利用BBD響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)確定最佳提取條件：微波時(shí)間63 s，微波功率264 w，料液比1:32，超聲功率540 w，實(shí)際測得的黃酮提取率為90.68±0.53%。
　　4.利用超聲波輔助雙水相法提取山楂葉黃酮和多糖，以山楂葉黃酮和多糖的提取得率及分配系數(shù)為指標(biāo)，通過單因素實(shí)驗(yàn)篩選出PEG/(NH4)2SO4雙水相體系作為提取

4、溶劑，再結(jié)合BBD響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)，確定超聲波輔助雙水相法提取的最佳工藝條件：在PEG質(zhì)量分?jǐn)?shù)11.5%，(NH4)2SO4質(zhì)量分?jǐn)?shù)14%條件下，超聲處理的條件為料液比1:37，超聲時(shí)間35 min，超聲功率360 w，超聲溫度67℃，在此條件下，黃酮提取得率為2.869%，多糖的提取得率為3.005%。
　　5.通過比較七種不同大孔樹脂對山楂葉黃酮粗提取液的吸附及解吸效果的影響，篩選出D101大孔樹脂作為山楂葉黃酮純化的最佳樹脂。利用

5、D101樹脂的靜態(tài)及動(dòng)態(tài)吸附解吸實(shí)驗(yàn)，確定 D101樹脂純化山楂葉黃酮的最佳工藝條件：樣液pH5.0，上樣液流速1.0 mL/min，上樣液體積70 mL，40%乙醇為洗脫劑，洗脫流速1.0 mL/min，洗脫劑用量100 mL，純化樣品經(jīng)冷凍干燥后測其純度為42.4%，較未純化前純度提高2.8倍。
　　6.利用Sephadex LH-20凝膠柱對D101樹脂純化后的山楂葉黃酮進(jìn)行分離、純化。采用水、20%、40%、60%及無水乙