焦慮抑郁行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法

1、一、 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)（Open Open field field test test）又稱敞箱實(shí)驗(yàn)，是評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。例如動(dòng)物對(duì)新開(kāi)闊環(huán)境的恐懼而主要在周邊區(qū)域活動(dòng)，在 中央?yún)^(qū)域活動(dòng)較少，但動(dòng)物的探究特性又促使其產(chǎn)生在中央?yún)^(qū)域活動(dòng)的動(dòng)機(jī)。1 .開(kāi)口的木盒底部形成16個(gè)等大的方格。場(chǎng)地中央置一彩色瓶子以激發(fā)小鼠的好奇心。 照明來(lái)自一高出場(chǎng)地中央2. 80 m的40 W白熾燈。2 .預(yù)適應(yīng)：每只小鼠放

2、入場(chǎng)地中央自由活動(dòng)3min3 .每只小鼠面朝墻放入同一個(gè)拐角方格，并讓其自由探索環(huán)境5 min。4 .每只小鼠測(cè)試結(jié)束后，濕布洗擦場(chǎng)地并用干布擦干。5 .數(shù)據(jù)分析：跨越方格總數(shù)（以雙后肢跨出作為標(biāo)準(zhǔn)，時(shí)間也以后肢為算。）第一格的 潛伏期、周邊時(shí)間、抬腿次數(shù)（雙腿離地）。二、 高架十字迷宮（elevated plus-maze, EPM）是非條件反射模型，以動(dòng)物自發(fā)的恐懼樣反應(yīng)為行為學(xué)基礎(chǔ)。高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)就是由于動(dòng)物對(duì)新環(huán)境的探究和對(duì)

3、高懸開(kāi)放臂的恐 懼而形成的矛盾沖突狀態(tài)，從而反映出動(dòng)物的焦慮情緒，所以高架十字迷宮既可以建立非 條件反射焦慮動(dòng)物模型，也可以作為測(cè)量動(dòng)物焦慮反應(yīng)的方法。1 .將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入迷宮中央?yún)^(qū)，頭朝開(kāi)臂，并注意此后每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均放在同一位置。2 .同時(shí)開(kāi)啟攝像監(jiān)控器記錄5min內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物開(kāi)臂和閉臂的進(jìn)入次數(shù)及進(jìn)入各臂的時(shí)間。 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)者需距離迷宮1米的距離。3 .記錄結(jié)束后將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放回飼養(yǎng)籠具內(nèi)。同時(shí)清理迷宮，并用5%的醋酸水溶液或75%

4、 的酒精擦拭迷宮，借以消除動(dòng)物氣味對(duì)后繼實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響。4 .分析：（1）開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)百分比=開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)/開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)+閉臂進(jìn)入次數(shù)（2）開(kāi)臂滯留時(shí)間百分比=開(kāi)臂滯留時(shí)間/開(kāi)臂滯留時(shí)間+閉臂滯留時(shí)間進(jìn)入開(kāi)放臂時(shí)間百分比和進(jìn)入開(kāi)放臂次數(shù)百分比反映了動(dòng)物的焦慮狀態(tài)；進(jìn)入開(kāi)放臂和 封閉臂總次數(shù)反映動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)能力，向下探究次數(shù)反映了動(dòng)物在非保護(hù)區(qū)內(nèi)的探索行為，與 焦慮程度有一定相關(guān)性。。三、 明暗穿梭實(shí)驗(yàn)：回避實(shí)驗(yàn)是利用動(dòng)物的好暗避光（明暗穿

5、梭）而建立起來(lái)的。1 .將小鼠放入明箱，讓小鼠進(jìn)行自由穿梭，觀察5min。2 .每只小鼠測(cè)試結(jié)束后，濕布洗擦場(chǎng)地并用干布擦干。3 .分析：穿梭次數(shù)、潛伏期、明箱活動(dòng)時(shí)間、明箱活動(dòng)時(shí)間百分比、暗想活動(dòng)時(shí)間、暗箱 活動(dòng)時(shí)間百分比、總路程、明箱活動(dòng)路程、暗箱活動(dòng)路程。藥物抗抑郁作用的動(dòng)物模型。該實(shí)驗(yàn)方法是一種行為絕望實(shí)驗(yàn)法，其基本原理 是當(dāng)大鼠或小鼠放進(jìn)一個(gè)有限的空間使之游泳，開(kāi)始時(shí)拼命游泳力圖逃脫，很快就變成漂浮 不動(dòng)狀態(tài)，僅露出鼻孔保持呼

6、吸，四肢偶爾劃動(dòng)以保持身體不至于沉下去，實(shí)際是動(dòng)物放 棄逃脫的希望，屬于行為絕望。經(jīng)典的強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)分兩天進(jìn)行。第一天讓大鼠或小鼠在2 5 ℃的深水中強(qiáng)迫游泳1 5 min ,取出后在犯℃溫室烘干，歸籠。第二天，在同樣的條件下進(jìn)行強(qiáng)迫游泳5 min , 記錄不動(dòng)時(shí)間。Mirua H等將強(qiáng)迫游泳的時(shí)間改為（1 0 — 3 0） mini 1。張中 啟等在實(shí)驗(yàn)第2天直接觀察小鼠強(qiáng)迫游泳6 min內(nèi)后4 m i n的不動(dòng)時(shí)間圖。這些都是對(duì)經(jīng)

7、 典實(shí)驗(yàn)方法所做的修改。大鼠或小鼠的不動(dòng)時(shí)間是判斷抗抑郁藥物作用的指標(biāo)。不動(dòng)時(shí)間越 短，抗抑郁作用越強(qiáng)。Detke等將強(qiáng)迫游泳中的行為分成4類：游泳（動(dòng)物在水中四處游動(dòng)）、攀爬（動(dòng)物前爪劃 動(dòng)水面，碰觸缸壁）、潛水（動(dòng)物整個(gè)身體沉于水下）和不動(dòng)（動(dòng)物四肢不動(dòng)漂浮于水面，僅 頭部露出水面呼吸）。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明不同機(jī)制的抗抑郁藥影響不同的行為，如地昔帕明和馬普 替林（N E再攝取抑制劑）可選擇性增加大鼠的攀爬行為，而氟西汀（5-HT再攝取抑制劑

8、） 選擇性增加大鼠的游泳行為川。六、懸尾實(shí)驗(yàn)（Tail suspension test, TST）是一種經(jīng)典而又能快速評(píng)價(jià)抗抑郁藥物、興奮藥物、 鎮(zhèn)靜藥物藥效的方法。其原理是利用小鼠懸尾后企圖逃脫但又無(wú)法逃脫，從而放棄掙扎，進(jìn) 入特有的抑郁不動(dòng)狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中記錄動(dòng)物不動(dòng)時(shí)間來(lái)反映抑郁狀態(tài)，抗抑郁藥物、興奮 藥物能明顯地縮短改變其狀態(tài)。末次給藥lh后，將小鼠尾部距末端約1cm處用夾子固定, 使其倒吊于距地面15 cm左右的橫桿上，動(dòng)物

9、為克服不正常體位而掙扎活動(dòng)，但活動(dòng)一段時(shí) 間后，出現(xiàn)間斷性不動(dòng)，顯示失望狀態(tài)，累計(jì)各組8 min內(nèi)的不動(dòng)時(shí)間七、新環(huán)境進(jìn)食抑制實(shí)驗(yàn)（Novelty Novelty suppressed suppressed feeding feeding test, test, NSF NSF）： ）：使用邊長(zhǎng)50cm>高40cm箱底鋪勻2cm高木削的試驗(yàn)箱，箱底中央放置糖丸或小塊食物于白紙上。試驗(yàn)前 動(dòng)物禁食24h,試驗(yàn)時(shí)從任意的箱角放大/小