芒果苷元降尿酸藥效驗證及其藥代動力學(xué)研究.pdf

1、芒果苷元化學(xué)名為1,3,6,7-四羥基氧化蒽酮，屬于雙苯并吡喃酮類黃酮化合物，是芒果苷的活性代謝物?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)芒果苷元具有多種藥理作用，在多種疾病的治療中存在巨大潛力，尤其在降尿酸作用中，芒果苷元既可以降低體內(nèi)血尿酸水平，又可以改善高尿酸引起的腎臟損傷，具有很好的研究價值。本文對其降尿酸作用進行驗證，研究它在動物體內(nèi)的藥代動力學(xué)及組織分布，并創(chuàng)新性地提出將其制備成分散片，通過口服給藥達到提高片劑溶出度和生物利用度的目的。
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2、研究主要內(nèi)容包括：⑴硅膠柱色譜法分離純化半化學(xué)合成的芒果苷元粗品，制備高純度的芒果苷元。采用硅膠柱層析法將芒果苷元粗品依次用體積比為10:0.2:0.5、10:0.3:0.5、10:0.5:0.5、10:0.7:0.5、10:1:0.5的氯仿-甲醇-甲酸混合洗脫劑進行洗脫。通過MS、1H-NMR和IR對得到的產(chǎn)物進行結(jié)構(gòu)確認(rèn)。 HPLC測得芒果苷元的含量大于98.6％（面積歸一化法）。⑵觀察芒果苷元對高尿酸血癥小鼠的降尿酸作用。將雄性昆

3、明小鼠隨機分為6組：空白組、模型組、芒果苷元低、中、高劑量（5、10、15 mg·kg-1）組、別嘌醇組。除空白組外，其余各組灌胃給藥氧嗪酸鉀鹽，建立高尿酸血癥模型，第6天開始造模后空白組、模型組給予生理鹽水，其余各組給予相應(yīng)治療藥物，治療時間為7天，實驗結(jié)束后分別測定血清中尿酸、尿素氮、肌酐及肝臟中黃嘌呤氧化酶的含量。結(jié)果顯示，與模型組相比，芒果苷元可以顯著降低高尿酸血癥小鼠的尿酸水平，抑制肝臟黃嘌呤氧化酶的活性，并對高尿酸血癥小鼠腎

4、臟損害有改善功能。⑶建立測定大鼠血漿樣品中芒果苷元含量的HPLC法，探討其在大鼠胃腸道給藥后的藥代動力學(xué)過程。單劑量灌胃給藥芒果苷元后，于不同時間點對大鼠眼眶靜脈叢取血，以對硝基苯酚為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，血漿樣品用乙酸乙酯-甲酸（10:1）萃取，HPLC測定血漿中芒果苷元的濃度。色譜條件為：色譜柱：Platisil5μm ODS(250×4.6 mm)；流動相：乙腈-水-甲酸（40:60:0.5 pH=2.74)；柱溫：室溫；流速：0.8 mL·

5、min-1；檢測波長：312 nm。進樣體積：20μL。結(jié)果顯示，芒果苷元在0.54~162μg·mL-1血漿濃度范圍內(nèi)呈線性關(guān)系（r=0.998）。日內(nèi)日間精密度RSD值均小于7.5%，提取回收率均大于74.3%。用藥動學(xué)軟件Winnonlin6.1計算主要藥動學(xué)參數(shù)為：t max為0.5 h；t1/2為(3.46±0.903) h；ρ max為（26.9±3.17）μg·mL-1；AUC0-t為(52.4±12.0)μg·h·mL-

6、1；MRT0-t為(2.67±0.16) h。⑷觀察小鼠胃腸道給藥后，芒果苷元在各組織的分布情況。小鼠單劑量灌胃給藥芒果苷元，分別于15、30、50、90 min脫臼處死，迅速取出心、肝、脾、肺、腎、腦組織。以對硝基苯酚為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，各組織勻漿樣品用甲醇-甲酸（6:1）萃取， HPLC測定各組織勻漿中芒果苷元的濃度。結(jié)果顯示，在0.46~46μg·mL-1組織勻漿濃度范圍內(nèi)，芒果苷元在心、肝、脾、肺、腎、腦組織中呈線性關(guān)系（r＞0.993

7、），日間日內(nèi)精密度RSD均小于8.4%，提取回收率均大于72.2%。結(jié)果顯示，胃腸道給藥后，芒果苷元迅速分布于心、肝、脾、肺、腎組織中，其中肝、腎組織中30 min時達到最大濃度，肺組織中50min達到最大濃度，肝組織中濃度最高，其次為腎、肺組織。心、脾組織中只在15min時檢測到芒果苷元，30 min時未檢測到。在腦組織中未檢測到芒果苷元，說明芒果苷元不能透過血腦屏障。⑸篩選芒果苷元分散片制備工藝的最優(yōu)處方。粉末直接壓片法壓片，以分散