共振光散射法在蛋白質(zhì)和藥物分析中的應(yīng)用.pdf

1、共振光散射技術(shù)(resonancelightscattering，RLS)是一項借助普通熒光分光光度計靈敏檢測聚集體光散射信號的分析技術(shù)。自1993年P(guān)asternack等人首次提出將RLS技術(shù)用于生物大分子組裝化學(xué)以來，該技術(shù)因其簡便、快速，靈敏度高、無需使用復(fù)雜儀器等優(yōu)點而倍受關(guān)注。作為一種新的分子光譜技術(shù)，RLS技術(shù)已被廣泛地用于生物大分子和藥物等的分析研究領(lǐng)域，成為分析化學(xué)領(lǐng)域強有力的分析技術(shù)。這些研究發(fā)現(xiàn)，與生物大分子測定常采

2、用的分光光度法和熒光光度法相比，RLS技術(shù)除了能獲得更高靈敏度的優(yōu)點外，還具有更廣泛探針范圍的優(yōu)勢，與藥物分析常見的分光光度法和高效液相色譜法相比，RLS技術(shù)表現(xiàn)出更簡便、更靈敏的特征。 基于RLS技術(shù)，本文分別以與蛋白質(zhì)作用的噸鎓類染料吡咯紅Y和陰離子單偶氮染料波爾多紅、及與藥物作用的曙紅B為例，成功地將RLS技術(shù)應(yīng)用于生物大分子蛋白質(zhì)和藥物定量測定中，從而進一步證明了RLS技術(shù)在拓展光譜探針方面的優(yōu)勢。全文有六個章節(jié)組成。

3、 第一章：簡述了RLS技術(shù)、RLS新技術(shù)及其分析應(yīng)用，綜述了2000年以來RLS技術(shù)在蛋白質(zhì)和藥物分析中的應(yīng)用，并對其發(fā)展作了總結(jié)和展望，引用文獻(xiàn)135篇。 第二章：在硫酸存在下，吡咯紅Y-SDS體系的RLS信號被蛋白質(zhì)強烈增強，其最大散射峰位于364nm。增強的RLS強度與蛋白質(zhì)的濃度在一定范圍內(nèi)成正比，由此建立了測定蛋白質(zhì)的新方法。測定牛血清白蛋白和人血清白蛋白的線性范圍分別為0.15～3.6μg/mL和0.06～4.

4、8μg/mL，檢測線分別為21.0ng/mL和12.0ng/mL。該方法成功地用于合成樣、人血清和尿樣中蛋白總含量的測定。 第三章：在pH3.92的酸性條件下，波爾多紅與蛋白質(zhì)作用導(dǎo)致體系的RLS增強，在波長363nm處光散射強度最大，且RLS增強程度與蛋白質(zhì)的濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。用于血清、尿樣和唾液中蛋白質(zhì)的測定，結(jié)果令人滿意。 第四章：在pH3.50Walpole緩沖溶液，鹽酸氯丙嗪與鹵代熒光素染料曙紅B共存

5、時，體系產(chǎn)生顯著增強的RLS信號，其最大散射峰位于364nm處。該方法測定鹽酸氯丙嗪的線性范圍為0.05～3.0μg/mL，檢測限為19.8ng/mL，并成功地應(yīng)用于鹽酸氯丙嗪片劑、針劑和人血清及尿樣中鹽酸氯丙嗪的測定。 第五章：在pH3.50，微量的鹽酸異丙嗪對曙紅B溶液有RLS增強作用。在最大散射波長363nm處測定，體系的RLS增強強度與鹽酸異丙嗪的濃度在0.075～4.5μg/mL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，據(jù)此建立了一種測定鹽酸