親水磁性富集材料的制備及其在糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用.pdf

1、蛋白質(zhì)糖基化是生命體內(nèi)最為重要和復(fù)雜的翻譯后修飾之一，研究發(fā)現(xiàn)其與重大疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，在細(xì)胞與基質(zhì)間的生物信號(hào)傳導(dǎo)過程中起著重要作用。然而由于大量高豐度的非糖基化蛋白對(duì)微量糖基化蛋白的抑制作用，使得糖基化蛋白需要經(jīng)過富集分離，方能實(shí)現(xiàn)對(duì)其分析與檢測(cè)。本論文針對(duì)傳統(tǒng)的親水磁性納米材料制備時(shí)間長(zhǎng)，步驟繁瑣等問題，制備了對(duì)糖肽富集的親水磁性納米材料。此外，還通過代謝組學(xué)策略對(duì)新疆維吾爾族和漢族大學(xué)生尿液的代謝輪廓差異進(jìn)行了研究。具體

2、如下：
　?。?）采用碳化二亞胺活化將羧甲基環(huán)糊精（CMCD）“一步”嫁接到磁性納米顆粒的表面，成功制備了羧甲基環(huán)糊精包覆磁性納米顆粒的糖肽富集材料。通過透射電子顯微鏡（TEM）、熱失重分析儀（TG）、X射線衍射（XRD）等方法對(duì)其進(jìn)行表征。材料表面的羧甲基環(huán)糊精賦予了材料很好的親水性，良好的磁響應(yīng)能力可以實(shí)現(xiàn)快速分離。將其應(yīng)用于復(fù)雜樣品鼠肝富集，從65μg蛋白提取液共鑒定出494個(gè)糖基化蛋白質(zhì)666個(gè)N-糖基化位點(diǎn)。
　　

3、（2）采用簡(jiǎn)單的“一鍋法”制備了羧甲基纖維素包覆磁性納米顆粒的復(fù)合材料，用透射電子顯微鏡（TEM）、熱失重分析儀（TG）、傅立葉變換紅外光譜儀（FT-IR）等方法對(duì)其進(jìn)行表征。表明材料表面被包覆了帶有豐富羧基和羥基的有機(jī)高分子羧甲基纖維素。將其應(yīng)用于復(fù)雜樣品鼠肝富集，從65μg蛋白提取液共鑒定出206個(gè)糖基化蛋白質(zhì)231個(gè)N-糖基化位點(diǎn)。
　?。?）以新疆兩個(gè)人口最多的世居民族維吾爾和漢族為對(duì)象，基于氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)35名