四種藥物的毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光法分析.pdf

1、毛細(xì)管電泳(CE)是一種高效的分離分析工具，具有進(jìn)樣量少，分辨率高，靈敏度高，選擇性好，操作成本低等優(yōu)點。電化學(xué)發(fā)光(ECL)具有操作簡單，背景噪音低，線性范圍寬等優(yōu)點。近年來，CE-ECL聯(lián)用技術(shù)倍受關(guān)注，越來越多的應(yīng)用于痕量、復(fù)雜樣品的分離分析。
　　 本論文利用CE-ECL聯(lián)用技術(shù)，建立了四種藥物--鹽酸托莫西汀、鹽酸林可霉素、甲硝唑和鹽酸麻黃堿測定的分析方法體系；研究了鹽酸托莫西汀、鹽酸麻黃堿與細(xì)胞色素C、肌紅蛋白及牛血

2、清白蛋白三種蛋白的相互作用。本研究所獲得的結(jié)果為上述四種藥物的快速測定及實驗研究提供了新的方法參考和依據(jù)。具體內(nèi)容如下：
　　 1.通過實驗條件的優(yōu)化，首次建立了測定鹽酸托莫西汀的毛細(xì)管電泳-電致化學(xué)發(fā)光分析體系。通過對鹽酸托莫西汀膠囊、大鼠口服給藥血漿濃度的測定，考察了方法的可行性。結(jié)果表明，在最佳的實驗條件下：檢測電位為1.15V；檢測池中聯(lián)吡啶釕的濃度為5 mmol/L，磷酸鹽緩沖液濃度為70 mmol/L(pH8.0)；

3、電動進(jìn)樣條件為12 kV×10 s；分離電壓為12.5 kV；分離緩沖液為30 mmol/L(pH7.5)的磷酸鹽緩沖液。所建立的方法體系可用于鹽酸托莫西汀膠囊及血漿樣品中鹽酸托莫西汀的測定，為鹽酸托莫西汀實際樣品的分析提供了新的方法。
　　 2.由于毛細(xì)管電泳-電致化學(xué)發(fā)光分析體系能夠滿足對鹽酸托莫西汀的分析測定，據(jù)此首次利用本體系研究了鹽酸托莫西汀與三種蛋白--牛血清白蛋白(BSA)、細(xì)胞色素C(Cyt-C)和肌紅蛋白(Mb

4、)的相互作用，并且計算了它們之間的結(jié)合常數(shù)分別為9.51×103L/mol、1.15×104L/moL和7.38×103L/moL，結(jié)合位點分別為15.23、10.19和17.15。
　　 3.建立了毛細(xì)管電泳-電化學(xué)發(fā)光(CE-ECL)法測定鹽酸林可霉素注射液中鹽酸林可霉素含量的新方法。研究了檢測電位、磷酸鹽緩沖液濃度和pH值、分離高壓、進(jìn)樣電壓和進(jìn)樣時間、分離緩沖液的濃度和pH值等實驗條件對鹽酸林可霉素分離檢測條件的影響，得

5、到了優(yōu)化的實驗條件。鹽酸林可霉素在5×10-8～9×10-6g/mL范圍內(nèi)呈良好線性，檢出限為1.55×10-8g/mL，回收率為96.14％～100.29％。
　　 4.建立了毛細(xì)管電泳-電化學(xué)發(fā)光(CE-ECL)法測定甲硝唑注射液中甲硝唑含量的快速、靈敏的新方法。實驗得到測定甲硝唑的最優(yōu)條件：檢測電位1.20V、5 mmol/L的聯(lián)吡啶釕、磷酸鹽緩沖液濃度為60 mmol/L(pH7.0)、分離高壓為15kV、進(jìn)樣高壓為10

6、 kV、進(jìn)樣時間為14 s、分離緩沖液的濃度為15 mmol/L(pH7.0)。在此條件下，甲硝唑在8×10-8～2×10-6g/mL范圍內(nèi)呈良好線性(R2=0.997)，檢出限為9.7×10-9g/mL，并成功的應(yīng)用于兩個不同廠家的甲硝唑注射液和一個廠家的甲硝唑葡萄糖注射液中的甲硝唑含量的檢測，回收率為99.01％～100.75％。
　　 5.將毛細(xì)管電泳與Ru(bpy)32+電化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)相結(jié)合，應(yīng)用于對鹽酸麻黃堿的檢測

7、。在優(yōu)化的實驗條件下，其濃度線性范圍為6×10-8～6×10-6g/mL；檢出限(S/N=3)為4.51×10-9g/mL。本方法快速準(zhǔn)確，成功應(yīng)用于呋麻滴鼻液中鹽酸麻黃堿含量的測定，回收率為96.14％～100.29％。
　　 6.本論文利用CE-ECL檢測方法，首次建立了鹽酸麻黃堿與牛血清白蛋白(BSA)、細(xì)胞色素C(Cyt-C)和肌紅蛋白(Mb)這三種蛋白相互作用的新方法，并且計算了它們之間的結(jié)合常數(shù)分別為1.55×104