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文檔簡介
1、進樣系統(tǒng)一直是毛細管電泳技術中的一個重要部分。出于降低或消除電動進樣組分歧視現(xiàn)象的需要,通常在樣品內加入內標或用數(shù)學計算校正實驗結果。此外,各種類型的無組分歧視的電動進樣裝置柱已經在毛細管、微芯片電泳中體現(xiàn)了越來越重要的作用。這些方法可以在一定程度上消除進樣歧視,但也存在不足。加入內標或用數(shù)學計算校正峰面積的方法不僅繁瑣費時,而且應用也受到一定實驗條件的限制;目前改進的進樣裝置存在制作成功率低、操作復雜、成本高、影響EOF穩(wěn)定性等缺點,
2、因此有必要開發(fā)出一種快速簡便、成功率高的消除組分歧視的毛細管電動進樣方法。 在橋電場進樣法、外等電勢進樣法和補償式鐘擺進樣法的研究基礎上,本論文提出了電滲泵進樣和Teflon連接斷口進樣法,隔離毛細管進樣端和局部電場,用電滲流作為“泵”驅動樣品進入毛細管,從而有效地消除電動進樣組分歧視。為了便于監(jiān)測歧視效應的變化,本論文還定義了歧視度、標準歧視偏差。以這兩個參數(shù)為評價指標,分別考察了毛細管長度、進樣電壓和樣品溶液離子強度對電滲泵
3、和Teflon連接斷口進樣法消除歧視效應效果的影響,從而優(yōu)化進樣條件。同時分別對上述兩種進樣方法進行了可行性和性能驗證,并考察了它們的應用領域。為了消除在極端進樣條件下單電場進樣時引發(fā)的負歧視效應,提出了接地進樣電極進樣法。 實驗結果顯示,電滲泵進樣和Teflon連接斷口進樣法能有效消除電動進樣時發(fā)生的組分歧視,并適用于反向電滲體系和不同電泳遷移率的離子,分析結果呈現(xiàn)出良好的重現(xiàn)性。將進樣電極接地施加零電勢后,在進樣端形成理想的
4、零電勢,可以消除單電場進樣中由于“電容器”效應產生的負歧視。這兩種電滲驅動進樣可以分別應用在毛細管電色譜進樣、實際樣品分析和芯片“點樣”方面。 本論文所研究的消除毛細管電動進樣組分歧視的進樣方法避免了以往進樣方法的缺點。裝置制作簡便易行、材料廉價易得。雙毛細管構造和柱上斷口都不會對毛細管分析體系電流、電滲流的穩(wěn)定性、進樣量重現(xiàn)性、出峰時間、峰形和柱效等性能產生明顯影響。本論文的研究結果進一步證明,電滲泵進樣和Teflon連接斷口
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