反膠束純化胰蛋白酶及含膦二肽的微水合成驗證.pdf

1、反膠束萃取具有使用條件溫和,萃取效率高,成本低,溶劑可重復利用,不引起蛋白質和酶變性等許多優(yōu)點,用于分離和純化蛋白質等生物大分子具有巨大的應用前景.本論文運用該技術進行了從粗胰酶中分離純化胰蛋白酶的研究,對反膠束中胰蛋白酶STM圖像進行了探討,驗證了在AOT反膠束中用胰凝乳蛋白酶催化合成乙酰氨基苯丙?；?丁膦酸酰胺的反應.觀察AOT/異辛烷反膠束中胰蛋白酶的STM形貌,發(fā)現該酶的構象發(fā)生了變化,卷曲程度增加,空間結構更緊密,相對于水中"

2、剛性"增強,處于"部分活化"狀態(tài).由于處于"相對剛性"結構,其π-π共軛程度減弱,反膠束中紫外光譜、熒光光譜相對于水中均發(fā)生了藍移.本文驗證了在0.1mol/L AOT反膠束中,40℃,pH值9.40條件下,α-胰凝乳蛋白酶催化α-N-乙酰苯丙氨酸乙酯與α-氨基丁膦酸合成含膦二肽的反應.實驗結果表明:通過檢測游離氨基與鄰苯二甲醛反應產生的熒光,得到反應30min、60min后游離氨基比反應前顯著降低,因而證實乙酰氨基苯丙?；?丁膦酸酰胺