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文檔簡介
1、本文通過溶劑法研究藍莓花色苷的提取工藝,以花色苷提取量為指標,考察了乙醇體積分數(shù)、提取時間、提取溫度、pH值、料液比對園藍花色苷提取量的影響,優(yōu)化了提取工藝;采用 AB-8型大孔吸附樹脂對花色苷進行富集,利用高速逆流色譜技術對花色苷進一步分離純化,采用高效液相色譜-質譜聯(lián)用技術對藍莓花色苷的單體結構和含量進行測定,比較了北陸、燦爛、園藍三個品系藍莓花色苷含量和結構的差異;研究了影響藍莓花色苷穩(wěn)定性的因素;對三個品系藍莓花色苷的體外抗氧化
2、作用進行了系統(tǒng)評價,并初步探討了藍莓花色苷對α-葡萄糖苷酶的抑制作用,為更好地開發(fā)和利用藍莓資源提供科學依據(jù)和實驗參考。主要研究結論如下:
(1)、溶劑法提取藍莓花色苷最佳條件為:60%乙醇,料液比為l g:15 mL,提取時間120 min,pH3.0,提取溫度為40℃。
(2)、三個品系藍莓花色苷的最大吸收波長均為520 nm。通過高效液相色譜-質譜分析,北陸含有17種花色苷單體,分別是飛燕草色素-3-O-半乳糖
3、苷、飛燕草色素-3-O-葡萄糖苷、矢車菊色素-3-O-半乳糖苷、飛燕草色素-3-O-阿拉伯糖苷、矢車菊色素-3-O-葡萄糖苷、牽?;ㄉ?3-O-半乳糖苷、矢車菊色素-3-O-阿拉伯糖苷、牽?;ㄉ?3-O-葡萄糖苷、牽?;ㄉ?3-O-阿拉伯糖苷、芍藥色素-3-O-葡萄糖苷、錦葵色素-3-O-葡萄糖苷、錦葵色素-3-O-半乳糖苷、錦葵色素-3-O-阿拉伯糖苷、飛燕草色素-3-O-乙酰葡萄糖苷、錦葵色素-3-O-乙酰半乳糖苷、牽?;ㄉ?/p>
4、-3-O-乙酰葡萄糖苷、錦葵色素-3-O-乙酰葡萄糖苷。燦爛和園藍花色苷的組分相同,含有14種花色苷單體,分別是飛燕草色素-3-O-半乳糖苷、飛燕草色素-3-O-葡萄糖苷、矢車菊色素-3-O-半乳糖苷、飛燕草色素-3-O-阿拉伯糖苷、矢車菊色素-3-O-葡萄糖苷、牽?;ㄉ?3-O-半乳糖苷、矢車菊色素-3-O-阿拉伯糖苷、牽牛花色素-3-O-葡萄糖苷、芍藥色素-3-O-半乳糖苷、牽?;ㄉ?3-O-阿拉伯糖苷、芍藥色素-3-O-葡萄糖
5、苷、錦葵色素-3-O-葡萄糖苷、錦葵色素-3-O-半乳糖苷、錦葵色素-3-O-阿拉伯糖苷。北陸花色苷中含有?;ㄉ眨顼w燕草色素-3-O-乙酰葡萄糖苷、錦葵色素-3-O-乙酰半乳糖苷、牽?;ㄉ?3-O-乙酰葡萄糖苷、錦葵色素-3-O-乙酰葡萄糖苷,而燦爛和園藍花色苷中不含有酰基化花色苷。燦爛和園藍品系中含有芍藥色素-3-O-半乳糖苷單體,而北陸花色苷中不含有該種單體。除此之外,北陸、燦爛和園藍3個品種藍莓含有相同結構的花色苷達13
6、種,但各單體花色苷含量有很大的差異。
經(jīng)過AB-8大孔吸附樹脂富集后,北陸、燦爛、園藍花色苷的含量分別為328.93±2.47mg/g、304.88±2.20mg/g、234.61±0.96mg/g;再經(jīng)過高速逆流色譜純化后,北陸、燦爛、園藍花色苷的含量為662.56±1.27 mg/g、547.93±0.88 mg/g、438.71±3.91mg/g。北陸花色苷含量最高,而園藍花色苷含量則是最低的,北陸花色苷含量比燦爛高出1
7、14.63±0.92 mg/g,比園藍高出223.85±1.81 mg/g。采用高效液相色譜結合標準品比對后,北陸花色苷中的?;ㄉ蘸窟_到43.13±0.38 mg/g,占整個花色苷含量的6.51%。北陸花色苷中飛燕草色素和錦葵色素兩種苷元占主要部分,分別占總量的37.1%、35.4%;飛燕草色素-3-O-半乳糖苷的含量最高,達到110.87±6.95mg/g,是燦爛花色苷的3倍,是園藍花色苷的5倍;牽?;ㄉ?3-乙酰葡萄糖苷的
8、含量最低,為6.47±0.01 mg/g。燦爛花色苷中矢車菊色素和錦葵色素兩種苷元占主要部分,分別占總量的27.25%,32.33%。園藍花色苷中錦葵色素苷元的含量占整個花色苷含量的45.21%,燦爛和園藍花色苷的組成相同,但燦爛花色苷中矢車菊色素苷元的含量是園藍花色苷的2倍,其余花色素苷元的含量相差不大。
(3)、園藍花色苷在pH小于3.0條件下比較穩(wěn)定,在60℃以下熱穩(wěn)定性較好,對光比較敏感,耐氧化還原性差,高濃度的蔗糖和
9、葡萄糖對其有不同程度的護色效果,低濃度的苯鉀酸鈉對該花色苷穩(wěn)定性良好,高濃度的苯鉀酸鈉對該花色苷有破壞作用,抗壞血酸使花色苷的穩(wěn)定性下降,K+、Ca2+、Al3+具有增色作用,但對花色苷的穩(wěn)定性無明顯影響;低濃度的Na+、Mg2+對藍莓花色苷增色效應不明顯,而高濃度的Na+能夠增強花色苷的穩(wěn)定性;高濃度的Zn2+、Mn2+具有增色作用,且能夠增強花色苷的穩(wěn)定性; Fe3+、Cu2+對花色苷具有破壞作用,使花色苷的穩(wěn)定性下降。
10、(4)、三個品系藍莓花色苷均具有良好的體外抗氧化作用和α-葡萄糖苷酶的抑制活性。北陸花色苷的還原能力、對亞油酸氧化的抑制作用、ORAC值、對DPPH·清除能力均比燦爛、園藍更強,但對α-葡萄糖苷酶的抑制能力相對最弱??寡趸芰Φ呢暙I可能跟藍莓花色苷的相對含量有相關性,而α-葡萄糖苷酶抑制活性跟藍莓花色苷的不同單體結構和相對含量可能存在相關性,因此有必要深入研究藍莓花色苷單體抑制α-葡萄糖苷酶的構效關系,為揭示膳食花色苷防治糖尿病打下基礎
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