疏水色譜法對(duì)豬心中細(xì)胞色素C的分離純化及液相色譜法對(duì)還原變性牛胰島素折疊特性的研究.pdf

1、西北大學(xué)碩士學(xué)位論文疏水色譜法對(duì)豬心中細(xì)胞色素C的分離純化及液相色譜法對(duì)還原變性牛胰島素折疊特性的研究姓名：姚叢申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：白泉20040501反相色譜法進(jìn)一步進(jìn)行了驗(yàn)證。對(duì)稀釋法、SEC法及脲梯度SEC法對(duì)還原脲變、胍變Ins的復(fù)性結(jié)果進(jìn)行了比較，結(jié)果表明脲梯度法對(duì)還原變性Ins的復(fù)性效果最好，SEC法次之，稀釋法最差，且還原脲變Ins復(fù)性效果要好于還原胍變Ins。4疏水色譜法對(duì)還原變性牛胰島素折疊特性的

2、研究用疏水色譜法(HIC)對(duì)還原變性牛胰島素的再折疊特性進(jìn)行了研究。分別考察了在HIC流動(dòng)相中改變GSSG／0SH對(duì)比率及脲濃度對(duì)還原變性Ins折疊效率的影響。結(jié)果表明流動(dòng)相中添加GSSG／GSH比率為6：1及脲濃度為2molL‘1時(shí)對(duì)還原變性Ins的復(fù)性效果最好，并用反相色譜對(duì)這一結(jié)果進(jìn)行了進(jìn)一步的驗(yàn)證。對(duì)稀釋法與HIC法對(duì)還原變性Ins的復(fù)性效果進(jìn)行了比較，結(jié)果表明HIC法對(duì)還原變性Ins的復(fù)性效果優(yōu)于稀釋法。5離子交換色譜法對(duì)還原

3、變性牛胰島素折疊特性的研究用強(qiáng)陰離子交換色譜法對(duì)還原變性胰島素的再折疊特性進(jìn)行了研究。分別考察了IEC流動(dòng)相中鹽種類(lèi)，添加GSSG／GSH對(duì)，不同脲濃度及pH值對(duì)還原變性Ins折疊效率的影響。結(jié)果表明在流動(dòng)相中添加GSSG／GSH及20molL。1脲且pH值為8時(shí)對(duì)還原變性Ins的復(fù)性效果最好。通過(guò)紫外吸收光譜和熒光光譜對(duì)還原變性Ins的復(fù)性結(jié)果進(jìn)行檢驗(yàn)，進(jìn)一步證實(shí)了流動(dòng)相中添加GSSG／GSH對(duì)和20molL’1脲有利于還原變性Ins