若丹寧光散射法對(duì)藥物和生物大分子的分析及其作用機(jī)理的研究.pdf

1、本文利用尚未見報(bào)道的3-對(duì)甲基苯基-5-(2'-磺酸基苯基偶氮)若丹寧和3-對(duì)甲基苯基-5-(4'-甲基-2'-磺酸基苯基偶氮)若丹寧試劑，建立了共振瑞利散射和二級(jí)散射技術(shù)測(cè)定脫氧核糖核酸、牛血清白蛋白、硫酸新霉素以及金屬鋁離子的高靈敏度新方法。通過(guò)紫外、熒光、共振瑞利散射和二級(jí)散射等手段初步研究了若丹寧類試劑與生物大分子和藥物分子間的相互作用機(jī)理。 本文的研究?jī)?nèi)容主要分為以下幾個(gè)方面: 1.首次將若丹寧類試劑作為生物大

2、分子脫氧核糖核酸和牛血清白蛋白的光譜探針，系統(tǒng)研究了在十二烷基磺酸鈉微乳液環(huán)境中，探針與生物大分子相互作用的共振瑞利散射和二級(jí)散射光譜特征及其反應(yīng)條件，建立了共振瑞利散射和二級(jí)散射法測(cè)定痕量核酸和蛋白質(zhì)的新方法。通過(guò)研究磺酸基偶氮若丹寧探針與生物大分子的相互作用，發(fā)現(xiàn)探針主要以較弱的疏水作用力、氫鍵和范德華力與生物大分子結(jié)合。當(dāng)加入十二烷基磺酸鈉時(shí)，作用力類型發(fā)生轉(zhuǎn)變，探針通過(guò)十二烷基磺酸鈉的橋鍵作用以靜電引力與生物大分子結(jié)合為三元離子

3、締合體系，引起體系光譜性質(zhì)的顯著改變。 2.首次將若丹寧類試劑應(yīng)用于藥物的共振瑞利散射和二級(jí)散射法中，系統(tǒng)研究了兩種方法測(cè)定氨基糖苷類抗生素的實(shí)驗(yàn)條件，建立了具有較高靈敏度和較好選擇性測(cè)定新霉素的新方法。 利用量子化學(xué)的RHF/3-21G*解析梯度方法，采用Gaussian-98程序?qū)θ舻?、新霉素和十二烷基磺酸鈉的基態(tài)電荷、偶極距和軌道占據(jù)能進(jìn)行計(jì)算，對(duì)各物質(zhì)問(wèn)可能的作用情況進(jìn)行了預(yù)測(cè)，并通過(guò)紫外光譜和離子強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)證實(shí)

4、了量子化學(xué)的預(yù)測(cè)結(jié)果-各物質(zhì)之間主要以靜電引力發(fā)生相互作用。 3.以二級(jí)散射為手段研究了3-對(duì)甲基苯基-5-(4'-甲基-2'-磺酸基苯基偶氮)若丹寧與金屬鋁離子的相互作用，在十六烷基三甲基溴化銨微乳液環(huán)境中，牛血清白蛋白的加入能夠促使體系形成四元離子締合體系，導(dǎo)致體系二級(jí)散射強(qiáng)度急劇增強(qiáng)，基于此建立了二級(jí)散射法測(cè)定金屬鋁離子的新方法。方法具有很高的靈敏度，檢測(cè)限達(dá)5.51ng·mL-1。并應(yīng)用于實(shí)際樣品的測(cè)定，取得了滿意效果。