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文檔簡介
1、青貯飼料是發(fā)展畜牧業(yè)的重要物質(zhì)基礎(chǔ),乳酸菌決定了青貯飼料的質(zhì)量,隨著我國畜牧產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展,對青貯飼料的需求量也逐漸增大,提高飼料的利用率是解決飼料不足的關(guān)鍵。漆酶對包裹在纖維素外的木質(zhì)素具有很強(qiáng)的降解能力,有利于纖維素充分的降解。近年,對于漆酶的降解功能受到越來越多的關(guān)注,因此本文以布氏乳桿菌為試驗(yàn)材料,采用生物物理技術(shù)引入漆酶基因擬構(gòu)建新型乳酸菌。以期該菌的代謝產(chǎn)物中既有乳酸又有漆酶,故而既提升了飼料的品質(zhì)也提高了飼料的利用率。
2、r> 本課題主要結(jié)論如下:
1、選取多種食用菌為試驗(yàn)材料,依據(jù)RB亮藍(lán)變色強(qiáng)度從中挑選三種食用菌,采用ABTS法定量測定三種食用菌的漆酶活性,杏鮑菇的酶活性為324.07U/L,平菇的酶活性為43.98U/L,白靈菇的酶活性為17.36U/L,即漆酶活性由高到底分別為杏鮑菇、平菇、白靈菇。
2、根據(jù)側(cè)耳科漆酶基因共同保守序列設(shè)計引物,采用PCR方法獲得了三種典型木腐食用菌(白靈菇、杏鮑菇、平菇)漆酶的基因序列,擴(kuò)增
3、得到的片段長度均為2606 bp(GeneBank注冊號分別為KC789845、KC789846、KC789847)通過對基因序列的內(nèi)含子/外顯子分析,得出漆酶編碼區(qū)的cDNA序列,該基因的開放閱讀框由1596個核苷酸組成,編碼一個由531個氨基酸組成的多肽,預(yù)測杏鮑菇、平菇、白靈菇漆酶蛋白分子量分別為56682.0、56692.0、56727.1,等電點(diǎn)偏酸性,pI均為4.56,均含有9個可能的N-糖基化位點(diǎn)(Asn-Xaa-Thr/
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