人參皂苷CK臨床藥代動(dòng)力學(xué)生物樣品分析方法研究.pdf

1、背景：人參皂苷CK（Ginsenoside compound K）是一種通過(guò)生物轉(zhuǎn)化等方法制備的非天然二醇類人參皂苷。文獻(xiàn)報(bào)道人參皂苷CK能顯著抑制癌細(xì)胞增殖，通過(guò)阻滯G1期細(xì)胞分裂并且誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡等藥理活性。目前尚無(wú)采用LC-MS/MS法，在正離子條件下研究人參皂苷CK人體藥動(dòng)學(xué)的相關(guān)報(bào)道。
　　目的：建立靈敏、快速液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）測(cè)定血漿中人參皂苷CK，并應(yīng)用于人參皂苷CK人體藥動(dòng)學(xué)研究。并建立液相色

2、譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）同時(shí)測(cè)定人糞樣中人參皂苷CK及其代謝物（20(S)-原人參二醇（PPD）、477-1、477-2），研究人參皂CK人體單次給藥耐受性及物質(zhì)平衡研究。
　　方法：以紫杉醇為內(nèi)標(biāo)，經(jīng)甲基叔丁基醚液-液提取，以乙腈水為流動(dòng)相，梯度洗脫，分析柱為PhenomenexGemini C18色譜柱(50×2.0 mm，5μm)，以鋰加合離子，實(shí)現(xiàn)了人參皂苷CK的測(cè)定；實(shí)驗(yàn)所用的儀器為AB公司Qtrap5500型三

3、重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀，離子源為電噴霧電離源，正離子監(jiān)測(cè)并實(shí)現(xiàn)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)方式進(jìn)行，監(jiān)測(cè)。定量分析的金屬加合離子反應(yīng)分別為m/z629.2→449.2(人參皂苷CK)，m/z860.5→292.0(內(nèi)標(biāo)，紫杉醇)。以辛伐他汀為內(nèi)標(biāo)，經(jīng)沉淀蛋白法，以乙腈I水為流動(dòng)相，梯度洗脫，分析柱為Agilent Phenyl-Hexyl柱(50×2.1 mm I.D，1.8μm)，實(shí)現(xiàn)了人參皂苷 CK及其代謝物的測(cè)定，用于定量分析的離子反應(yīng)分別為

4、 m/z425.3→217.2(人參皂苷CK及PPD)，m/z477.1→143.0（477-1，477-2），m/z436.2→285.2(內(nèi)標(biāo)，辛伐他汀)。
　　結(jié)果：人參皂苷CK在1.00~1000 ng/mL范圍內(nèi)線性良好（r2＞0.9988）定量下限為1.00 ng/mL。待測(cè)物日內(nèi)和日間精密度均小于8.4％，準(zhǔn)確度（RE）在4.8%~6.5%之間，均符合生物樣品分析相關(guān)要求。本方法成功應(yīng)用于人參皂苷CK片人體藥動(dòng)學(xué)研究

5、。健康受試者單劑量口服人參皂苷CK片后的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)Cmax為652±180 ng/ml；Tmax為2.63±1.17 h；t1/2為5.97±0.68 h；AUC(0-t)為3654±853h·ng·mL-1；AUC(0-∞)為3814±893h·ng·mL-1。同時(shí)測(cè)定人糞勻漿中人參皂苷CK及其三個(gè)代謝物。人參皂苷CK和PPD的線性范圍均為0.5~100μg/g定量下限均為0.5μg/g，477-1和477-2的線性范圍均為0.0