藍(lán)桉葉精油微波無溶劑法提取及抗氧化、抗菌活性研究.pdf

1、本文以藍(lán)桉葉片為原料，采用無溶劑微波輔助提取技術(shù)對藍(lán)桉葉片中精油成分進(jìn)行提取，通過響應(yīng)面法對提取工藝進(jìn)行優(yōu)化;并運(yùn)用GC-MS檢測了不同提取方法獲得的藍(lán)桉葉精油的化學(xué)成分和相對含量;通過DPPH自由基清除法、鐵還原能力實(shí)驗(yàn)(FRAP)和β-胡蘿卜素-亞油酸漂白法等抗氧化試驗(yàn)，確定了藍(lán)桉精油的抗氧化活性;考察了藍(lán)桉葉精油對3種鐮刀菌的抑制活性;依據(jù)MTT法原理，檢測藍(lán)桉葉精油對小鼠巨噬細(xì)胞Raw264.7增殖的抑制作用;同時(shí)為實(shí)現(xiàn)提取剩余

2、物的高效利用，對其中的沒食子酸和鞣花酸成分的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。其主要內(nèi)容如下：
　　1、選用無溶劑微波輔助提取藍(lán)桉葉精油，通過動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)與其他傳統(tǒng)提取方法進(jìn)行比較。此外對無溶劑微波輔助提取的條件進(jìn)行了單因素實(shí)驗(yàn)的篩選，結(jié)合響應(yīng)面分析，確定了無溶劑微波輔助提取藍(lán)桉葉精油的最佳提取條件:含水率約59.7％，微波輻射時(shí)間22min和微波功率575W。在此的條件下精油得率為6.6mL/kg。
　　2、建立了GC-MS檢測藍(lán)桉葉精油

3、化學(xué)成分的分析方法，氣相色譜條件:石英毛細(xì)管色譜柱(30m×0.25mmc×0.25μm)，手動(dòng)進(jìn)樣1μl，氣化室溫度為270℃，載氣為高純He(99.999％)，流速1.0mL/min，以10℃/min的速度從40℃升高到165℃，再以5℃/min從165℃升高到200℃，再以10℃/min的速度從200℃升高到250℃，不分流進(jìn)樣。質(zhì)譜條件:電離源EI，電子能量70eV，傳輸線溫度280℃，離子源溫度230℃，四極桿溫度150℃，掃

4、描范圍為15-500amu，通過NIST02質(zhì)量光譜庫直接比較確定精油的組成成分。藍(lán)桉葉精油的主要成分為1，8-桉葉素、α-松油醇和α-松油醇醋酸酯等。
　　3、采用DPPH自由基清除法、鐵還原能力(FRAP)和β-胡蘿卜素-亞油酸漂白法對精油的抗氧化性能進(jìn)行測試，并與天然抗氧化劑Vc和Ve進(jìn)行比較，藍(lán)桉葉精油具有一定的抗氧化活性，并且無溶劑微波輔助提取精油的抗氧化性優(yōu)于水中蒸餾提取的精油。
　　4、采用體外抗菌法，研究了精

5、油對擬枝孢鐮刀菌、黃色鐮刀菌、茄病鐮孢藍(lán)色變種的抗菌效果。藍(lán)桉葉精油對大部分類型的鐮刀菌都具有一定的抑制作用，其中較敏感菌株是擬枝孢鐮刀菌和黃色鐮刀菌，最低抑菌濃度(MIC)分別1.25μl/mL和0.75μl/mL。殺菌曲線反映了藍(lán)桉葉精油的殺菌作用呈濃度依賴的關(guān)系。
　　5、采用MTT檢測法，研究藍(lán)桉葉精油對Raw264.7細(xì)胞抑制作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)藍(lán)桉葉精油作用Raw264.7細(xì)胞后，各處理組細(xì)胞增殖受到抑制，活細(xì)胞數(shù)量隨精油質(zhì)