海洋厭氧細(xì)菌SRB-22和PSB-11抗菌活性物質(zhì)的研究.pdf

1、半個(gè)世紀(jì)以來，陸棲微生物早已成為抗生素、酶抑制劑等生物活性物質(zhì)的重要資源，一度形成了輝煌的抗生素時(shí)代。隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，在臨床上引起兩個(gè)問題：一是細(xì)菌耐藥性逐年增加，致使一些抗生素的療效降低，甚至無效；另一問題是一些不致病的細(xì)菌成為條件致病菌，在臨床上造成一定的威脅。因而需要不斷篩選新結(jié)構(gòu)和新的抗菌作用機(jī)制的新抗生素以滿足臨床需要。然而對陸生微生物的長期研究已使得陸地這一古老資源日趨枯竭，因此，拓寬尋找新藥的途徑迫在眉睫。海洋獨(dú)特的

2、自然條件：高壓、低營養(yǎng)、無光照、局部高溫、高鹽等，使得海洋微生物具有特殊的代謝途徑和遺傳背景，從而具有產(chǎn)生特殊結(jié)構(gòu)和功能活性物質(zhì)的能力。據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，約27％的海洋微生物都能產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì)。已經(jīng)成為篩選新型抗生素的重要來源。 本文對分離自大連黑石礁海域海水樣品的一株具有抗菌活性的硫酸鹽還原細(xì)菌SRB-22菌株及一株具有抗菌活性的光合細(xì)菌PSB-11菌株進(jìn)行了研究，考察了菌株不同培養(yǎng)時(shí)間對活性物質(zhì)產(chǎn)量及活性強(qiáng)弱的影響，并對其抗菌活

3、性代謝產(chǎn)物進(jìn)行了研究。主要研究結(jié)果如下：通過對SRB-22菌株抗菌活性物質(zhì)的研究，建立并優(yōu)化了大孔吸附樹脂提取SRB-22菌液中活性產(chǎn)物的方法，確定了最佳提取方案為：SRB-22菌液沙濾，除去硫化物顆粒，調(diào)菌液pH6，通過NKA大孔吸附樹脂柱。發(fā)酵液與樹脂的最適質(zhì)量比為9/1。經(jīng)過正相硅膠柱層析、制備薄層層析、反相硅膠柱層析及反相HPLC制備層析，從SRB-22菌液粗提物中得到1個(gè)純化合物，通過對其1H譜、13C譜DEPT-90及DEP

4、T-135譜的解析，再與有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，確定該化合物為鄰苯二甲酸單丁酯。對PSB-11菌株抗菌活性物質(zhì)的研究中，考察了不同培養(yǎng)時(shí)間對活性物質(zhì)產(chǎn)量的影響；建立并優(yōu)化了大孔吸附樹脂聯(lián)用提取菌液中活性產(chǎn)物的方法。通過實(shí)驗(yàn)，確定了最佳培養(yǎng)時(shí)間為28天；確定了最佳提取方案為：調(diào)菌液pH至8．0，過H103樹脂柱，再調(diào)pH至7．0，過SIPI-40樹脂柱；從60L菌液分離得到11．18克固相萃取物，確定了含有極性差異較大活性物質(zhì)的3個(gè)活