一種RARγ新型配體及其生物學(xué)活性的研究.pdf

1、廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和《廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動規(guī)范(試行)》。另外，該學(xué)位論文為(同％)課題(組)的研究成果，獲得(1藹鼬)課題(組)經(jīng)費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室的資助，在(同／劾)實(shí)驗(yàn)室完成。(請在以上括號內(nèi)填寫課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒?yàn)室名稱，未有此項(xiàng)聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲明人(簽

2、名)：j參小乒耋擴(kuò)∥年媚哆日摘要摘要視黃酸受體7(RetinoicAcidReceptorgamma，ltAlⅥ)，作為核受體超家族重要成員之一，在生物體生長、發(fā)育、代謝、免疫、分化、增殖、炎癥、凋亡等過程中均發(fā)揮著重要作用。RARy一般與核受體RXRa形成異源二聚體形式，在細(xì)胞核發(fā)揮調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的活性。但是近年來的研究發(fā)現(xiàn)，RARy以及其他一些核受體會出核與胞質(zhì)中的蛋白直接相互作用進(jìn)而快速參與到胞外的信號調(diào)控，發(fā)揮核受體的“非基因型作

3、用”。因此，RARy一直以來都是藥物干預(yù)和治療過程中重要且極具吸引力的靶點(diǎn)，而尋找RARy的新型配體對于揭示RARy新的生物學(xué)活性和作為特定疾病治療靶點(diǎn)的潛能具有重要的意義。本課題基于以上理念，通過報告基因篩選系統(tǒng)，從化合物庫篩選到選擇性調(diào)控RARy的化合物XS0005。XS0005是一個苯基硫脲芳香類化合物，是本課題組根據(jù)之前發(fā)表的RXR0t的coregulator表面結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)構(gòu)，利用visualscreening技術(shù)從小分子化合

4、物庫篩選并從specs公司購買獲得，到目前為止還沒有關(guān)于其活性的研究報道。我們在篩選的過程中發(fā)現(xiàn)XS0005化合物對RARy有特異的轉(zhuǎn)錄抑制作用，并通過體外實(shí)驗(yàn)證明XS0005與RARy存在直接結(jié)合。我們通過體外結(jié)合實(shí)驗(yàn)和Glidedocking的方法推測其在RARy上的可能結(jié)合位點(diǎn)和對結(jié)合起關(guān)鍵作用的氨基酸，結(jié)果發(fā)現(xiàn)XS0005可能并不結(jié)合在核受體經(jīng)典的LBP口袋，而是結(jié)合在表面coregulator的結(jié)合位置。RAW2647小鼠巨噬

5、細(xì)胞中，我們發(fā)現(xiàn)XS0005能夠抑制本底以及炎癥因子LPS激活的ERK通路，其作用機(jī)制可能是通過促進(jìn)RARy與TRAF6的相互作用進(jìn)而誘導(dǎo)TRAF6的降解。另外，我們發(fā)現(xiàn)在MCF7人乳腺癌細(xì)胞中XS0005也會誘導(dǎo)TRAF2的降解并抑制ATRA對AKT的激活。在生理功能上，我們發(fā)現(xiàn)XS0005會使RAW2647小鼠巨噬細(xì)胞周期阻滯在S期并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。因此，本研究揭示了一個新型的RARe的配體XS0005，其可能通過結(jié)合在RARy表面c