6-（取代苯胺）-4-氨基嘧啶羧酸衍生物的設(shè)計(jì)、合成及生物活性研究.pdf

1、目的：
　　以EGFR為靶標(biāo)，選取4，6-二取代嘧啶為母核，對(duì)4號(hào)位進(jìn)行丁二酸酐/戊二酸酐取代，合成一系列新型EGFR選擇性抑制劑。對(duì)合成的新化合物進(jìn)行激酶抑制活性測(cè)定及體外抗腫瘤活性測(cè)試，研究其構(gòu)效關(guān)系。
　　方法：
　　1.以4-氨基-6-氯嘧啶為原料，與丁二酸酐/戊二酸酐?；磻?yīng)得中間體1a/1b。中間體1a/1b與苯胺類化合物反應(yīng)得到化合物A類/B類化合物，A類/B類化合物與乙醇酯化得到C類/D類化合物。

2、>　　2.采用Mobility shift assay測(cè)定目標(biāo)化合物A1-A7、B1-B5、C1-C7、D1對(duì)FGFR1、VEGFR、EGFR、EGFRL858R、EGFRd746-750、EGFRT790M的抑制活性。
　　3.選用WST-1試劑盒檢測(cè)20個(gè)目標(biāo)化合物A1-A7、B1-B5、C1-C7、D1對(duì)HL7702、MDA-MB453、H460、PC-9、A549、SGC、A431、H1975抑制活性。
　　4.EL

3、ISA檢測(cè)目標(biāo)化合物A1-A7、B1-B5、C1-C7、D1對(duì)炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-6的抑制作用。
　　結(jié)果：
　　1.合成20個(gè)目標(biāo)化合物A1-A7、B1-B5、C1-C7、D1，化合物結(jié)構(gòu)經(jīng)過ESI-MS、1H-NMR確認(rèn)。
　　2.激酶抑制活性篩選結(jié)果顯示，A4、B3、B4、C4、D1五個(gè)化合物對(duì)受體酪氨酸激酶EGFR有較高的選擇性，并對(duì)單突變型EGFRL858R、EGFRd746-750更為敏感，對(duì)雙突

4、變型EGFRT790M/L858R無明顯抑制作用。
　　3.體外抗腫瘤活性篩選結(jié)果顯示，化合物D1安全性高，對(duì)FGFR高表達(dá)細(xì)胞株抑制率低于5％，且對(duì)PC-9細(xì)胞IC50=27.8μM。
　　4.抗炎結(jié)果顯示目標(biāo)化合物均無明顯抗炎作用。
　　結(jié)論：
　　以4-氨基-6-氯嘧啶為原料合成20個(gè)新化合物，結(jié)構(gòu)均通過ESI-MS、1H-NMR鑒定。采用Mobility shift assay測(cè)定目標(biāo)化合物A1-A7、B