桑樹枝條韌皮部提取物的體內(nèi)降血糖作用及其機(jī)制探討.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以桑樹枝條韌皮部（簡(jiǎn)稱桑枝皮）為材料，通過醇水溶液萃取的方法得到桑枝皮提取物，研究其體外抑制a-葡萄糖苷酶的生物活性，探討這種活性成份在桑樹根、莖、葉內(nèi)的分布以及百個(gè)桑樹栽培品種之間的差異；應(yīng)用分子生物學(xué)等方法探討這種桑枝皮提取物添食對(duì)糖尿病小鼠的治療作用和降血糖的機(jī)制。
　　通過對(duì)栽培桑品種不同部位的活性提取物進(jìn)行體外糖苷酶活性抑制試驗(yàn)的結(jié)果分析表明，桑葉提取物的a-葡萄糖苷酶抑制活性最低，而桑枝皮與桑根皮提取物均具有較高

2、的a-葡萄糖苷酶抑制活性。其中本地廣泛種植的栽培?！?2的枝皮提取物對(duì)a-葡萄糖苷酶活性的抑制中值IC50為2.01mg/mL。對(duì)101個(gè)栽培桑品種桑枝皮提取物a-葡萄糖苷酶抑制活性分析顯示，不同桑樹品種具有不同a-糖苷酶抑制活性。同時(shí)，湖桑32提取物還具有較強(qiáng)的1,1-二苯基苦基苯肼自由基（DPPH）清除能力，并且清除能力隨其濃度升高而增強(qiáng)，其 IC50為0.53 mg/mL。1-脫氧野尻霉素（DNJ）是a-葡萄糖苷酶的有效抑制劑

3、，通過反相高效液相色譜（HPLC）分析，20種栽培桑的桑枝皮提取物的DNJ含量范圍為0.44~9.79 mg/g，但這些桑枝皮提取物的降血糖活性與 DNJ含量水平的相關(guān)性很小，相關(guān)系數(shù)僅為 R=0.0085。這也就是說，本實(shí)驗(yàn)制備的桑枝皮提取物的體外強(qiáng)力抑制a-葡萄糖苷酶的主要活性成份還可能另有其物，如黃酮類、香豆素、桑辛素、二苯乙烯基類或其它生物堿類等化合物。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，高脂高糖飼料飲食能極顯著提高鏈脲佐菌素（STZ）誘

4、導(dǎo)小鼠的糖尿病發(fā)病率（90%）。當(dāng)小鼠飲食含有2.5%、5%或10%桑枝皮粉末的高脂高糖飼料2周后，再進(jìn)行STZ誘發(fā)小鼠糖尿病實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明高脂高糖飼料加入不同劑量的桑枝皮粉末都能基本消除高脂高糖飲食對(duì)小鼠引起的不良影響，降低高脂高糖飲食小鼠STZ-誘導(dǎo)糖尿病的發(fā)病率。其中，高劑量組添加10%桑枝皮粉末的高脂高糖飼料喂養(yǎng)2周后預(yù)防效果最為顯著，其STZ-誘發(fā)小鼠糖尿病的發(fā)病率僅為50%。
　　利用尾靜脈注射STZ誘導(dǎo)小鼠建立2型糖

5、尿病模型，以每天灌胃一次50、100或200 mg/kg·BW劑量的給藥方式連續(xù)處理三周后，試驗(yàn)結(jié)果表明湖桑32桑枝皮提取物添食能夠減緩 STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠體重的暴瘦，消除或減少糖尿病小鼠肝臟和腎臟的腫大，并降低 STZ誘導(dǎo)的小鼠血清胰島素水平，改善糖尿病小鼠的胰島素抵抗，調(diào)節(jié)糖尿病小鼠的血脂四項(xiàng)異常。應(yīng)用熒光定量 PCR技術(shù)研究表明，湖桑32桑枝皮提取物添食能改善糖尿病小鼠的肝臟糖代謝相關(guān)基因 G6Pase、GCK、PEPCK等