安徽部分地區(qū)鴨疫里氏桿菌的分離鑒定及其生物學特性研究.pdf

1、鴨疫里氏桿菌病是由鴨疫里氏桿菌(Riemerella anatipestfer,RA)引起的的一種主要侵害雛鴨、雛火雞等多種禽類的急性或慢性傳染病。該病的發(fā)病率和死亡率較高,已成為目前危害世界各國養(yǎng)鴨業(yè)最為嚴重的傳染病之一,給養(yǎng)鴨業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。RA現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)21個血清型,各血清型之間很少有交叉保護性；對于已感染RA的鴨群,經(jīng)常用藥易產(chǎn)生耐藥菌株。因此,建立快速檢測RA的方法、了解RA血清型的變化趨勢以及開展RA疫苗方面的研究,對

2、于該病的有效防制是十分必要的。 本研究根據(jù)RA 16S rRNA基因序列設計一對RA特異性引物,成功地建立了檢測RA的PCR方法,特異性強,同時該PCR方法能檢出20 pg的RA DNA,靈敏度高,這為RA的檢測提供了一種快速、敏感、特異性強的檢測方法。應用該PCR方法對病料組織直接進行RA檢測,腦組織為首選檢測對象,具有良好的實際應用意義。 利用常規(guī)方法和建立的PCR方法對安徽省滁州市、六安市、安慶市、合肥市、巢湖市和

3、蚌埠市六個地區(qū)108份病/死鴨進行RA檢測,六個地區(qū)均檢測出RA,陽性檢出率為24.07％(26/108),其中滁洲市RA分離株占總分離株的57.69％(15/26),顯示安徽地區(qū)RA的感染較為普遍,滁洲地區(qū)感染情況嚴重。 26株RA分離株中20株為血清1型,占總分離株的76.92％,6株未定型,表明安徽省目前至少存在兩種不同的血清型,而2000年以前的分離株均屬血清1型,說明安徽省RA流行菌株的血清型存在動態(tài)變化,血清型呈現(xiàn)多

4、極化的趨勢。 對安徽省RA分離株的16S rRNA基因和cam基因進行擴增和序列測定,并與國內(nèi)外參考菌株進行同源性比較,結(jié)果表明不同血清型、同一血清型的不同菌株之間及不同地區(qū)的菌株之間16S rRNA基因序列無明顯差異,RA 16S rRNA基因核苷酸序列差異的距離與地理分布、菌株來源無一定的相關性；不同毒力株之間cam基因并無明顯差異,根據(jù)cam基因無法判斷不同菌株的毒力強弱。 通過動物回歸試驗,測定8株RA分離株的毒