羅格列酮對哮喘大鼠氣道平滑肌收縮的影響.pdf

1、目的：支氣管哮喘(以下簡稱哮喘)是以氣道高反應(yīng)性為特征的慢性炎癥性疾病,被世界醫(yī)學(xué)界公認(rèn)為四大頑癥之一。其病理學(xué)改變以氣道內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤為主。盡管近年來對哮喘發(fā)病機(jī)制和治療的研究取得了一定進(jìn)展,但其發(fā)病率在世界范圍內(nèi)仍有增高的趨勢,并且部分病例常規(guī)治療效果不理想。因此,對哮喘發(fā)病機(jī)理的深入研究和尋找其他有效的治療方法具有非常重要的意義。本文旨在通過在體和離體氣管環(huán)試驗探討過氧化物酶體增殖物活化受體γ(P

2、eroxiso-ome proliferator activated receptorγ,PPARγ)配體激動劑羅格列酮(Rosiglita-zone,RSG)對氣道平滑肌收縮作用的影響,為其是否能應(yīng)用于哮喘的臨床治療提供新的理論依據(jù)。方法：1、雄性SD大鼠75只,采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分為正常組(A組)、哮喘組(B組)、RSG治療組(C組),每組25只,制備各組大鼠的離體去上皮氣管環(huán)分別為a、b、c組。2、哮喘大鼠模型的建立:第1d、第

3、7d,B、C組大鼠腹腔注射10％的卵蛋白(ovalbumin, OVA)(10mg卵蛋白和100mg Al(OH)3溶解于1ml蒸餾水中)1ml致敏,A組給予等量蒸餾水腹腔注射。第14d-30d,B、C組大鼠用50ul的2mg?ml-1濃度OVA滴鼻,C組大鼠在滴鼻前用4mg·kg-1的鹽酸羅格列酮片稀釋于5ml生理鹽水中灌胃治療,B組大鼠用等量生理鹽水灌胃,A組大鼠用等量生理鹽水滴鼻和灌胃。3、末次激發(fā)后,每組取出5只大鼠肺組織HE染

4、色,比較支氣管粘膜和粘膜下嗜酸性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤情況。4、末次激發(fā)后,測定三組大鼠的引喘潛伏期。5、將大鼠離體氣管環(huán)置于37℃裝有Krebs-Henseleit液和95％O2、5％CO2的浴槽中,通過張力換能器、生物放大器與生理記錄儀相連,采用Chart軟件采集記錄氣管環(huán)張力變化。(1)比較0.05mmol·L-1、0.5mmol·L-1、5mmol·L-1濃度梯度乙酰膽堿(Acetycholine ACh)激發(fā)下,三組大鼠離體氣管

5、環(huán)收縮張力大小。(2)比較0.01 mmol·L-1、0.1 mmol·L-1、1 mmol·L-1三種濃度RSG對ACh預(yù)收縮的a、b組離體氣管環(huán)的舒張作用。(3)觀察吲哚美辛、亞甲基藍(lán)、普萘洛爾、左旋硝基精氨酸甲(NG-Nitro-Larginine Methyl Ester, Hydrochloride L-NAME)、伊比蝎毒素(Iberiotoxin IbTX)對RSG舒張a、b組氣管環(huán)作用的影響。(4)觀察0.01 mmol

6、·L-1、0.1 mmol·L-1、1 mmol·L-1三種濃度RSG對a、b組離體氣管環(huán)的ACh量效曲線的影響。結(jié)果:1、肺組織HE染色,b組支氣管粘膜和粘膜下嗜酸性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤較其余兩組明顯增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05,n=20)。2、三組大鼠引喘潛伏期:B組

7、意義,(均P<0.05,n=20)。(2)三種濃度RSG對ACh預(yù)收縮的a、b組大鼠離體氣管環(huán)均有舒張作用,且呈濃度依賴性,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05,n=20);但a組和b組相比,三種濃度RSG對氣管環(huán)的舒張作用的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05,n=20)。(3)吲哚美辛、L-NAME、亞甲基藍(lán),普萘洛爾不能阻斷a組大鼠氣管環(huán)RSG引起的舒張,差異無統(tǒng)計學(xué)意義,(均P>0.05,n=20);L-NAME能阻斷b組RSG引起的舒

8、張,IbTX對a組和b組RSG引起的舒張均有阻斷作用,且對a組的阻斷作用更強(qiáng),其差異有統(tǒng)計學(xué)意義,(均P<0.05,n=20)。(4)三種濃度RSG使a、b組大鼠立體氣管環(huán)ACh量效曲線明顯右移。結(jié)論：RSG能減輕哮喘大鼠氣道炎癥細(xì)胞浸潤;RSG能延長哮喘潛伏期;RSG能降低氣道收縮張力;RSG對ACh預(yù)收縮的大鼠氣管環(huán)可產(chǎn)生舒張作用,此作用可能與前列環(huán)素、胞漿可溶性鳥苷酸環(huán)化酶、β腎上腺素受體無關(guān),而可能與大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(Larg