PPARγ激動(dòng)劑吡格列酮對(duì)哮喘小鼠氣道重塑的影響.pdf

1、目的：采用卵清蛋白(OVA)建立哮喘小鼠氣道重塑模型，觀察過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)激動(dòng)劑吡格列酮對(duì)哮喘小鼠氣道重塑及肺組織脂聯(lián)素表達(dá)的影響。
　　方法：1.將24只C57小鼠使用編號(hào)抽簽法隨機(jī)分為哮喘組、吡格列酮組、正常對(duì)照組，哮喘組和吡格列酮組在0、7、14天利用卵清蛋白腹腔注射致敏，第21天用2％OVA滴鼻激發(fā)，每周3次，持續(xù)8周，正常對(duì)照組給予相同容積生理鹽水致敏和激發(fā)，方法同上，吡格列酮組給予吡格列酮[1

2、0mg/(kg.d)]灌胃，激發(fā)時(shí)每次激發(fā)前1小時(shí)灌胃，哮喘組、正常對(duì)照組均給予相同容積生理鹽水灌胃。2.實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)麻醉處死各組小鼠，眼球取血測(cè)血糖。3.HE染色觀察肺組織病理改變。4.Masson染色觀察氣道上皮膠原沉積面積。5.Image-Pro Plus圖像分析軟件測(cè)量氣道相應(yīng)形態(tài)學(xué)改變。6.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)脂聯(lián)素受體1mRNA(AdipoR1mRNA)、脂聯(lián)素受體2mRNA(AdipoR2mRNA)、PPARγmRNA表達(dá)

3、。7.Western blot法檢測(cè)PPARγ、脂聯(lián)素蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.哮喘組小鼠可見(jiàn)呼吸急促，打噴嚏，大小便失禁，正常對(duì)照組小鼠行為無(wú)明顯異常。2.血糖測(cè)定：正常對(duì)照組、哮喘組、吡格列酮組血糖分別為8.27±0.54、8.95±0.74、8.22±0.95，3組小鼠血糖比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05）。3.HE染色病理改變：顯微鏡下可見(jiàn)正常對(duì)照組小鼠氣道上皮無(wú)明顯破壞，支氣管內(nèi)未見(jiàn)黏液分泌。哮喘組氣道上皮可見(jiàn)多處斷

4、裂和脫落，氣道上皮細(xì)胞腫脹明顯，支氣管內(nèi)可見(jiàn)大量黏液分泌。吡格列酮組可見(jiàn)氣道上皮細(xì)胞斷裂和脫落，支氣管內(nèi)可見(jiàn)黏液潴留，程度較哮喘模型組減輕。4.各組小鼠Masson染色改變：正常對(duì)照組氣道上皮下見(jiàn)少量膠原沉積，哮喘組氣道上皮下可見(jiàn)明顯膠原沉積，吡格列酮組氣道上皮下可見(jiàn)膠原沉積，沉積面積較哮喘組減少，Image-Pro Plus圖像分析軟件測(cè)定，3組氣道上皮下膠原沉積面積在各組中所占比例依次為（8.75±1.25）％、(44.71±6.8

5、8)％、(23.48±2.42)％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。5.氣道形態(tài)學(xué)改變：正常對(duì)照組、哮喘組、吡格列酮組氣道壁厚度依次為(15.39±0.83)μm、(32.18±0.76)μm、(23.84±0.91)μm，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01），以上三組平滑肌厚度依次為(3.42±0.27)μm、(11.46±1.86)μm、(7.70±0.16)μm，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01）。6.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)：正常對(duì)

6、照組、哮喘組、吡格列酮組PPARγmRNA表達(dá)量分別為(0.96±0.0260)、(2.12±0.1473)、(4.28±0.1640)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。AdipoR1mRNA在3組中表達(dá)量分別為(0.99±0.1250)、(0.44±0.0733)、(1.88±0.0510)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），AdipoR2mRNA在3組中表達(dá)量分別為(1.00±0.1170)、(0.46±0.0733)、(3.13

7、±0.1300)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。7.Wetern-blot法檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)：3組均可見(jiàn)脂聯(lián)素表達(dá)，與正常對(duì)照組比較，哮喘組呈弱表達(dá)，吡格列酮組中表達(dá)明顯增加，3組光密度值分別為(0.25±0.01)、(0.12±0.01)、(0.49±0.03)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。3組均可見(jiàn)PPARγ蛋白表達(dá)，與正常對(duì)照組比較，哮喘組表達(dá)稍有增加，吡格列酮組強(qiáng)表達(dá)，3組光密度值分別為(0.11±0.01)、(0.31±