ATP7Btx-J小鼠腦中金屬元素譜分析以及ATP7A表達(dá)的改變.pdf

1、目的：
　　本課題主要通過對C3HeB/FeJ-ATP7Btx-J純合型、雜合型和C3HeB/FeJ品系野生型鼠腦中不同部位（包括大腦皮層、小腦、基底神經(jīng)節(jié)和海馬區(qū)）多種金屬元素譜的分析測定以及銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ATP7A mRNA表達(dá)量的檢測，了解該模型小鼠腦中不同部位銅蓄積的同時，其他金屬元素含量變化以及ATP7B基因突變后ATP7A的表達(dá)情況，初步探索肝豆?fàn)詈俗冃陨窠?jīng)系統(tǒng)損傷的作用機(jī)制。
　　方法：
　　抽提小鼠尾巴DN

2、A，進(jìn)行包含突變點(diǎn)的序列的PCR擴(kuò)增、測序，鑒定出 ATP7Btx-J純合型、雜合型和野生型小鼠用于實驗。用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（ICP-MS）分析檢測小鼠大腦皮層、小腦、基底神經(jīng)節(jié)和海馬區(qū)的銅等23種金屬元素濃度。用Real Time PCR方法檢測小鼠大腦皮層、小腦、基底神經(jīng)節(jié)和海馬區(qū)ATP7A mRNA的表達(dá)量。
　　結(jié)果：
　　1、與野生型小鼠相比，大腦皮層中，ATP7Btx-J純合型小鼠鈹、釩、鎵、砷、鎘、鋇的濃

3、度有所升高，硒的濃度有所降低；雜合型小鼠鈹?shù)臐舛扔兴?。小腦中，ATP7Btx-J純合型小鼠銅、鉻、鈷、鈹、釩、鎵、砷、鋇、鉛、鈣的濃度有所升高，硒、銣的濃度有所降低；雜合型小鼠釩的濃度有所升高，硒、銣的濃度有所降低?；咨窠?jīng)節(jié)區(qū)，ATP7Btx-J純合型小鼠銅、鉻、鈷、鈹、釩、鎵、砷、鋇、鉛、鈾、鈣的濃度有所升高；雜合型小鼠無顯著差異。海馬區(qū)，ATP7Btx-J純合型小鼠銅、鈷、鈹、釩、鎵、鍶、鎘的濃度有所升高；雜合型小鼠無顯著差異

4、?？傊?，總體來說 ATP7Btx-J純合型小鼠基底神經(jīng)節(jié)和小腦的非必需金屬元素的濃度與野生型小鼠相比差異最顯著，就個別元素來說，鈣的差異最大。
　　2、與野生型小鼠相比，ATP7Btx-J純合型小鼠腦中不同部位ATP7A mRNA的表達(dá)量有所下降，并且在銅蓄積較多、神經(jīng)元損傷較嚴(yán)重的基底神經(jīng)節(jié)、小腦等部位更顯著。
　　結(jié)論：
　　1、銅代謝失衡會同時導(dǎo)致腦中其他多種金屬元素代謝的紊亂，這可能是導(dǎo)致肝豆?fàn)詈俗冃陨窠?jīng)系統(tǒng)損