達托霉素長循環(huán)脂質體抗耐甲氧西林金葡菌的研究.pdf

1、隨著病原體耐藥防控難度的持續(xù)增大，除不斷研發(fā)新型抗生素之外，對已有抗生素進行遞送研究與新制劑創(chuàng)制具有同等重要性。達托霉素是近年來上市的一種新型脂肽類抗生素，目前僅有其普通溶液型注射劑用于臨床。本文采用聚乙二醇修飾的脂質體作為載體，考察并系統(tǒng)評價經優(yōu)化制備的長循環(huán)達托霉素脂質體(PLD)抗耐甲氧西林金葡菌(MRSA252)全身感染。通過優(yōu)化制備得到的達托霉素脂質體粒徑（111.5±15.4）nm、載藥量較高（5.81±0.19）％，并具有

2、良好穩(wěn)定性。體內外評價結果顯示，在相同劑量下PLD與達托霉素原料藥及普通脂質體制劑相比，對MRSA252有更持久的抑制效果，并能顯著提高耐甲氧西林金葡菌全身感染模型小鼠的存活率。此外，PLD能顯著提高達托霉素在肺部的分布并顯示良好的安全性。上述研究結果提示，長循環(huán)脂質化達托霉素對抗MRSA嚴重感染（血源性肺炎等）具有良好的應用前景，可為達托霉素新制劑的研發(fā)及臨床相關研究提供重要參考。
　　本課題主要研究內容如下:
　　(1)

3、達托霉素長循分析方法的建立
　　確定達托霉素的最大吸收波長為221nm，并且還確定了HPLC檢測達托霉素的色譜條件:
　　色譜柱:Inertsil ODS-SP C18柱（150mm×5mm，5μm）
　　流動相:乙腈-0.5％磷酸二氫銨緩沖液=40∶60
　　流速:0.7 mL/min;檢測波長:221nm
　　進樣量:20μL;柱溫:30℃
　　出峰時間:6.5±0.2 min
　　最低檢測

4、限:0.60 ng
　　還通過回收率實驗、精密度實驗得出此種檢測方法準確且重現性好。
　　(2)達托霉素長循環(huán)脂質體的制備及相關性質考察
　　通過考察制備達托霉素長循環(huán)脂質體的幾個影響因素:氫化卵磷脂(HSPC)與膽固醇的摩爾比、脂藥質量比以及高壓均質機循環(huán)次數。最終得出制備達托霉素長循環(huán)脂質體的最優(yōu)處方為，氫化卵磷脂∶膽固醇∶mPEG2000-DSPE=18∶6∶1（摩爾比），脂藥比=15∶1（質量比），水化液經高壓

5、均質機1000 bars循環(huán)均質10次，就能得到穩(wěn)定的達托霉素長循環(huán)脂質體。由最優(yōu)制備工藝所制得的脂質體，粒徑為(111.5±15.4) nm，Zeta電位為(-15.1±2.8) mV，載藥量為(5.81±0.19)％，包封率為(92.56±3.15)％，并且性質穩(wěn)定，在4℃的冰箱中保存2個月后幾乎無泄漏、無沉淀現象發(fā)生。
　　(3)體外抗耐甲氧西林金葡菌實驗
　　主要考察達托霉素三個制劑:達托霉素原料藥水溶液DS、普通達

6、托霉素脂質體CLD、達托霉素長循環(huán)脂質體PLD對MRSA252生長的影響，結果表明，PLD對MRSA252的抑制效果更持久。
　　(4)藥動學及組織分布研究
　　結果表面達托霉素長循環(huán)脂質體延長了達托霉素在大鼠血液里的循環(huán)時間，且明顯的增加了達托霉素在肝、脾、肺的分布量。
　　(5)體內藥效學、安全性評價
　　通過比較DS、CLD、PLD對MRSA252致全身感染KM小鼠的治療效果比較，結果顯示，尾靜脈注射單次次