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文檔簡介
1、中山大學博士后學位論文Livin特異性siRNA對人膽管癌細胞生物學特性影響的實驗研究姓名:湯志華申請學位級別:博士后專業(yè):外科學指導教師:陳積圣葉林20080101博士后出站報告Livin特異性siRNA對人月曼管癌細胞生物學特性影響的實驗研究RNA,siRNA)后者再與體內(nèi)一些酶(包括內(nèi)切酶、外切酶、螺旋酶)結(jié)合形成RNA誘導的沉默復合物(RNAinducedsilencingcomplex,RISC),RISC與目的基因按堿基配對
2、原則結(jié)合后對mRNA進行降解。在哺乳動物細胞通過人為地引入合成的21“23bp雙鏈RNA就能起到siRNA作用,從而誘導內(nèi)源靶基因的mRNA降解,達到阻止基因表達的目的。因此應用RNAi技術抑制某一異?;虮磉_將可能用于病毒、腫瘤等疾病的治療。本研究若能證實Livin基因在膽管癌的發(fā)生發(fā)展和判斷預后方面有重要的作用,我們將設計以Livin基因為靶標的siRNA,試探Livin—siRNA對人膽管癌細胞體外增殖及凋亡的影響,從而為膽管癌的
3、基因治療提供新的理論基礎。本研究的第一部分,利用RT—PCR、免疫組化法檢測了Livin在人膽管癌組織及膽管癌細胞系中的表達情況,初步闡明Livin基因與膽管癌發(fā)生發(fā)展之間的關系;第二部分,利用化學合成的siRNA分子在體外抑制人膽管癌細胞系QBC939中Livin基因的表達,觀察Livin基因抑制后對人膽管癌細胞體外增殖、凋亡及侵襲性的影響,初步探討利用RNAi技術抑$1]Livin基因表達在膽管癌治療中的潛在意義。第一部分Livin
4、在人膽管癌組織及膽管癌細胞系中的表達和意義目的:探討Livin基因在人膽管癌組織及膽管癌細胞系中的表達情況,初步分析Livin基因與膽管癌發(fā)生發(fā)展之間的關系。方法:收集了45例人膽管癌組織及及20例非癌膽管組織標本切片,采用免疫組織化學技術(SP法)檢鋇JJLivin蛋白分別在上述標本中表達情況,分析Livin蛋白表達與膽管癌臨床病理特征的關系。同時采用RT—PCR法及SP法分別在mRNA和蛋白水平檢測了Livin在人膽管癌細胞系QBC
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