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1、PLK1(Polo—like kinases1)是PLK家族成員之一,是細(xì)胞周期依賴性激酶,在細(xì)胞有絲分裂調(diào)節(jié)過程中具有重要的作用。目前數(shù)個研究發(fā)現(xiàn)PLK1在非小細(xì)胞肺癌等腫瘤中的過表達(dá)現(xiàn)象與腫瘤的生物學(xué)行為及預(yù)后等密切相關(guān)。 目的:本實驗通過運(yùn)用脂質(zhì)體介導(dǎo)的特異性siRNA抑制PLK1基因表達(dá),研究其對人肺癌細(xì)胞A549的生長,增殖及凋亡影響。 方法:采用人肺癌細(xì)胞株A549為研究對象,利用對應(yīng)于PLK1基因特異性si
2、RNA,將脂質(zhì)體與其以不同比例混合后轉(zhuǎn)染肺癌細(xì)胞A549,熒光顯微鏡下觀察A549細(xì)胞內(nèi)siRNA轉(zhuǎn)染效率,并觀察A549細(xì)胞體外生長、增殖情況,并運(yùn)用TUNEL法觀察不同濃度siRNA轉(zhuǎn)染條件下A549細(xì)胞體外凋亡情況。 結(jié)果:TUNEL法顯示,隨著siRNA濃度的增加A549細(xì)胞存活率下降,凋亡率增加,其中以50nM組細(xì)胞形態(tài)變化最為明顯,凋亡細(xì)胞數(shù)最多,轉(zhuǎn)染48h與72h后水平細(xì)胞生長及凋亡情況無明顯差異。 結(jié)論:
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