晚期糖基化終產(chǎn)物對人近端腎小管上皮細胞生物學活性的影響.pdf

1、研究目的探討晚期糖基化終產(chǎn)物(AGEs)對人近端腎小管上皮細胞(PTEC)的存活/代謝活性和結(jié)締組織生長因子(CTGF)表達的干預作用;以及分子量對AGEs的生物學活性的影響,揭示AGEs在腎臟纖維化中的作用機制.研究方法1用凝膠層析法分離AGEs,用不同種類和濃度的AGEs干預人近端腎小管上皮細胞系HK-2不同時間,并用氨基胍、葛根素等在此基礎(chǔ)上進行干預,MTT法測定細胞的存活/代謝活性,半定量RT-PCR測定細胞CTGF和纖維結(jié)合素

2、(FN)mRNA表達水平.結(jié)果1 HK-2細胞的存活/代謝活性隨著孵育AGEs的葡萄糖濃度、AGEs的濃度以及干預時間的增加而降低(P<0.05);2 HK-2細胞中的CTGF mRNA表達量隨著孵育AGEs的葡萄糖濃度、AGEs的濃度以及干預時間的增加而增加(P<0.05);3氨基胍和葛根素呈濃度依賴性抑制AGEs對HK-2細胞的存活/代謝活性和CTGF mRNA表達量的影響(P<0.05);4 AGE-BSA呈時間和濃度依賴性地增加

3、HK-2細胞的FN mRNA的表達;CTGF反義寡核苷酸可以部分抑制此效應(yīng)(P<0.05);5 AGEs經(jīng)凝膠層析分離后各組分之間的熒光光譜和相對熒光強度沒有顯著差異;6 AGE-BSA分離前后各組分對細胞的存活/代謝活性和CTGF mRNA水平的影響不盡相同,各組分消化后得到的AGE肽之間的生物學活性沒有明顯差異(P>0.05),但均高于消化前(P<0.05).結(jié)論1 AGEs抑制PTEC的存活/代謝活性,增加其CTGF mRNA表達