海洋硫酸多糖916的藥代動(dòng)力學(xué)分析方法的研究.pdf

1、海洋硫酸多糖916是以海洋甲殼質(zhì)為原料,經(jīng)脫乙?；?、羧甲基化和硫酸酯化等多步分子修飾而成聚陰離子硫酸氨基多糖.經(jīng)系統(tǒng)的藥效學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)研究,發(fā)現(xiàn)916具有良好的抗動(dòng)脈粥樣硬化活性,已經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)作為Ⅰ類新藥進(jìn)入臨床研究.論文旨在為916的人體藥代動(dòng)力學(xué)研究提供前期的探討工作,考察了916在一定實(shí)驗(yàn)條件下的穩(wěn)定性并且建立了在生物樣品兔血清中的高效液相色譜檢測(cè)方法.在穩(wěn)定性研究方面,選擇生物體液中存在的兩種酶--溶菌酶和胰

2、蛋白酶作為考察條件,采用高效凝膠滲透色譜法(HPGPC)和明膠比濁法,分別考察不同指標(biāo),從分子量及分子骨架是否變化到有效基團(tuán)是否脫落以確定916的穩(wěn)定性.其中916的分子量及分子量分布系數(shù)采用HPGPC法考察,有效基團(tuán)硫酸酯基穩(wěn)定性的考察采用明膠比濁法定量檢測(cè)樣品中游離硫酸根的含量.結(jié)果表明在所選擇的實(shí)驗(yàn)條件下,916對(duì)溶菌酶和胰蛋白酶是穩(wěn)定的,可以推定,在血清中916不會(huì)被這兩種酶降解.為下一步研究916在生物樣品的前處理中及生物機(jī)體

3、內(nèi)的穩(wěn)定性進(jìn)行一定的準(zhǔn)備.論文首次利用高效液相色譜柱后衍生法測(cè)定兔血清中的916濃度,選取鹽酸胍作為衍生試劑,并探討了該衍生反應(yīng)條件的優(yōu)化.綜合比較幾種分析柱如氨基鍵合柱Asahipak NH<,2>P-50 4E、凝膠柱TSK-Gel.G2000PW、離子排阻柱Aminex HPX-87H的使用效果,確立離子排阻柱Aminex HPX-87H為硫酸多糖916的分析柱.在生物樣品兔血清的預(yù)處理中,應(yīng)用多種除蛋白法如蛋白沉淀劑三氯乙酸、高