成骨不全家系臨床及基因特征研究.pdf

1、成骨不全(Osteogenesis imperfecta，OI)又稱脆骨病(brittle bonedisease)，是一種以骨脆弱、骨骼畸形、藍鞏膜、進行性聽力下降、牙質(zhì)形成不全為典型臨床特征的單基因遺傳性結(jié)締組織疾病。國外報道該病患病率為1/10000-30000，國內(nèi)無相關(guān)資料。通常為常染色體顯性遺傳，隱性遺傳較罕見，一個家族中可有多個成員受累，危害極大．OI共分7型，臨床表現(xiàn)隨個體不同差異很大．本課題對一個中國漢族的OI家系的臨

2、床表現(xiàn)、致病基因和治療等方面進行了研究和總結(jié)。 目的：對OI家系臨床表現(xiàn)進行分析，明確遺傳方式；對先證者及其所在家系主要成員的相關(guān)基因進行檢測和分析，結(jié)合家系資料探討該病的分子生物學(xué)發(fā)病機制和分子生物診斷方法。 方法：對發(fā)現(xiàn)的OI家系進行現(xiàn)場調(diào)查，收集臨床資料及血標(biāo)本，繪制家系圖譜；總結(jié)并分析臨床特點；提取外周血基因組DNA標(biāo)本。以先證者基因組DNA為模板，采用PCR對COL1A1基因51個外顯子、COL1A2基因52個

3、外顯子及外顯子與內(nèi)含子交界處的剪切位點進行擴增，對PCR產(chǎn)物進行直接測序。測序結(jié)果與GeneBank中相應(yīng)基因的正常序列對比尋找突變位點，通過克隆(TA克隆)測序確認(rèn)突變。對家系其他成員相應(yīng)位點進行PCR擴增和測序。結(jié)合該家系成員臨床表型證實突變。對3例患者采用雙膦酸鹽治療，觀察療效。 結(jié)果： 1．臨床特征：該家系共4代60人，臨床診斷Ⅰ型OI的患者共20例(包括先證者母親和表姐(Ⅳ-10))，現(xiàn)場調(diào)查存在藍鞏膜15例；

4、牙質(zhì)形成不全者16例；進行性聽力下降5例；發(fā)生骨折者3例；其母親和表姐(Ⅳ-10)分別合并甲狀腺乳頭狀癌和Turner綜合征。家系圖譜顯示遺傳方式屬于常染色體顯性遺傳。 2．基因改變：先證者COL1A1基因10號外顯子234位氨基酸密碼子GAA中缺失了一個G(c700delG)，之后序列出現(xiàn)移碼突變，并于264位提前出現(xiàn)終止密碼子UGA。COL1A2基因外顯子未發(fā)現(xiàn)突變。先證者母親也存在相同突變，除先證者及其母親外其他提取了DN