人免疫缺陷病毒調(diào)升基因AEG-1促腫瘤細(xì)胞增殖的生物學(xué)作用與分子機(jī)制研究.pdf

1、Astrocyte elevated gene-1 (AEG-1)是人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus，HIV-1)感染人胚胎星形膠質(zhì)細(xì)胞后導(dǎo)致表達(dá)升高的一種蛋白質(zhì)；它也可在此類細(xì)胞中，受TNF—α或HIV-1的gp-120蛋白的誘導(dǎo)而產(chǎn)生。已有研究表明AEG-1在多種腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)量亦明顯升高，AEG-1表達(dá)升高可使黑色素瘤細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的非錨定依賴性生長的能力增強(qiáng)，并使星形膠質(zhì)細(xì)胞的抗

2、凋亡能力增強(qiáng)。迄今的研究發(fā)現(xiàn)，AEG-1參與了調(diào)控PI3K/AKT和NF—κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。有報道指出，抑制AEG-1的表達(dá)，可以隨之導(dǎo)致AKT通路的活性下降進(jìn)而上調(diào)FOXO3a的活性，促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的凋亡，減慢前列腺癌的進(jìn)程；另外的研究發(fā)現(xiàn)，AEG-1可促進(jìn)NF—κB入核，從而增強(qiáng)了腫瘤細(xì)胞的抗凋亡能力。上述研究提示AEG-1與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。在本實(shí)驗(yàn)室另一項(xiàng)研究證實(shí)，AEG-1在乳腺癌組織中高表達(dá)，其表達(dá)與臨床分期和

3、預(yù)后相關(guān)。但是，AEG-1在乳腺癌中的生物學(xué)功能仍不清楚。 乳腺癌的發(fā)病率在我國已經(jīng)上升為女性惡性腫瘤的第1或第2位，死亡率占第4位或第5位，成為婦女健康的最大威脅。明確其病因及發(fā)病機(jī)制是預(yù)防和治療乳腺癌的關(guān)鍵。目前的研究表明乳腺癌的發(fā)生受基因與環(huán)境兩大因素的影響，但對其發(fā)病的具體的分子機(jī)制卻知之甚少，乳腺癌的預(yù)后的判斷仍然依賴于一些常規(guī)的臨床與影像學(xué)指標(biāo)，例如，腫瘤的大小，病理分級，有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。至今為止，已有許多基因被認(rèn)

4、為是與乳腺癌轉(zhuǎn)移和(或)預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物，但仍缺乏獨(dú)立、有效的乳腺癌診斷指標(biāo)和與預(yù)后相關(guān)的分子標(biāo)記物。因此，闡述乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制，尋找特異性診斷和治療靶標(biāo)是目前乳腺癌基礎(chǔ)研究的重點(diǎn)。 本文旨在研究AEG-1基因?qū)θ橄侔┘?xì)胞增殖的影響，并探討其在人乳腺癌細(xì)胞中的作用機(jī)理。首先，本文做免疫組化檢測乳腺癌組織中AEG-1與Ki67的臨床相關(guān)性。隨后建立了兩株穩(wěn)定外源性高表達(dá)AEG-1和兩株下調(diào)細(xì)胞內(nèi)源性AEG-1表達(dá)的乳腺癌

5、細(xì)胞系，用于檢測AEG-1與乳腺癌細(xì)胞增殖的相關(guān)性。本文的數(shù)據(jù)顯示，上調(diào)AEG-1的表達(dá)能夠明顯促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的增殖和其非錨定依賴性生長的能力，反之下調(diào)內(nèi)源性AEG-1的表達(dá)則可明顯抑制乳腺癌細(xì)胞的生長。因此，AEG-1可能是促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞異常增生的重要分子。通過對AEG-1促增殖機(jī)制的研究，本文發(fā)現(xiàn)乳腺癌細(xì)胞增殖加快與細(xì)胞周期抑制物p27Kip1和p21Cip1有關(guān)，進(jìn)而證明了AEG-1是通過PI3K/AKT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路下調(diào)FOXO1