AEG-1在宮頸癌中的表達及其作用機制研究.pdf

1、第一部分AEG-1在人宮頸癌組織中的表達及意義
　　【目的】
　　探討AEG-1在宮頸癌組織中的表達及其與臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　【方法】
　　利用免疫組織化學方法檢測21例正常宮頸上皮組織、11例CIN組織、70例宮頸癌組織(鱗狀細胞癌58例,腺癌12例)中的AEG-1的表達情況,并分析其與臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　【結(jié)果】
　　AEG-1蛋白主要表達在宮頸癌細胞的核周和胞漿中。AEG-1

2、蛋白在CIN、宮頸鱗癌、宮頸腺癌組織中的表達水平明顯高于其在正常宮頸上皮組織中的表達水平,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);AEG-1蛋白的表達水平與臨床分期、組織學分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與肌層浸潤深度之間密切相關(guān),差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);AEG-1蛋白的表達水平與患者的年齡、組織類型之間無密切關(guān)系(p>0.05)。
　　【結(jié)論】
　　AEG-1在宮頸癌中呈高表達水平,可能參與了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程,AEG-1的表達水平

3、可能是潛在的預(yù)測宮頸癌的惡性程度和預(yù)后的重要指標之一,為其分子靶向治療提供參考。
　　第二部分siRNA下調(diào)AEG-1對人宮頸癌細胞系生物學行為的影響及其機制
　　【目的】
　　探討siRNA下調(diào)astrocyte elevated gene-1(AEG-1)對人宮頸癌細胞系Hela、Siha、C33a的增殖凋亡和侵襲轉(zhuǎn)移的影響及其機制。
　　【方法】
　　用設(shè)計合成的AEG-1siRNA轉(zhuǎn)染人宮頸癌細胞系

4、Hela、Siha、C33a后,RT-PCR和western blot法檢測AEG-1和β-catenin以及上皮細胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)因子(E-cadherin、N-cadherin和vimentin)的mRNA和蛋白表達水平的變化;細胞免疫熒光更直觀地觀察細胞中AEG-1蛋白表達水平的變化;CCK8法檢測沉默AEG-1對人宮頸癌細胞系的增殖抑制的影響;劃痕實驗和Transwell小室法檢測沉默AEG-1對人宮頸癌細胞系的侵襲遷

5、移能力的影響;流式細胞術(shù)檢測沉默AEG-1對人宮頸癌細胞系的凋亡的影響。
　　【結(jié)果】
　　用AEG-1siRNA轉(zhuǎn)染人宮頸癌細胞系Hela、Siha、C33a后,RT-PCR和Western blot結(jié)果證實AEG-1的mRNA和蛋白的表達水平均明顯降低;細胞免疫熒光結(jié)果示沉默AEG-1后,細胞核周和細胞質(zhì)中的AEG-1表達明顯減少;CCK8實驗結(jié)果表明沉默AEG-1能顯著抑制細胞增殖能力;Transwell小室法結(jié)果表明

6、沉默AEG-1細胞侵襲遷移能力明顯減弱;流式細胞術(shù)檢測結(jié)果表明沉默AEG-1后細胞調(diào)亡率明顯增加。沉默AEG-1后β-catenin、N-cadherin和vimentin的mRNA和蛋白的表達水平均明顯降低,E-cadherin的mRNA和蛋白的表達水平升高。
　　【結(jié)論】
　　沉默AEG-1可以顯著抑制人宮頸癌細胞系Hela、Siha、C33a的增殖和侵襲遷移能力,并誘導其凋亡;AEG-1可能通過β-catenin信號通