逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)肌凝蛋白基因轉(zhuǎn)移預(yù)防實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎的發(fā)生.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、心肌炎主要是由柯薩奇B組病毒等嗜心性病毒感染引起的心血管系統(tǒng)的常見病,心肌病理主要表現(xiàn)為心肌灶性壞死、纖維化和大量單個(gè)核細(xì)胞浸潤.我們采用差速離心、硫酸銨分級(jí)沉淀、離子交換層析等方法從豬心肌提取了肌凝蛋白,經(jīng)SDS-PAGE和Western blot鑒定證實(shí)提純蛋白中主要為肌凝蛋白α重鏈.我們采用RT-PCR等方法從幼齡大鼠心肌擴(kuò)增出包含該表位的681bp（2234-2914）肌凝蛋白重鏈基因片段,進(jìn)一步構(gòu)建與IL-2N末端的信號(hào)肽基因

2、連接,形成肌凝蛋白重鏈基因片段與IL-2信號(hào)肽的融合蛋白（IL-2-myosin）,構(gòu)建了表達(dá)該融合蛋白的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體.經(jīng)RT-PCR、Dot-blot、免疫組化、免疫電鏡等方法證實(shí)肌凝蛋白α重鏈基因片段可在IL-2信號(hào)肽引導(dǎo)下分泌表達(dá).結(jié)果表明,重組逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的肌凝蛋白骨髓細(xì)胞基因轉(zhuǎn)移后,可能在多能干細(xì)胞定向分化等過程中,通過使機(jī)體對(duì)肌凝蛋白自身反應(yīng)性T細(xì)胞的克隆失活、免疫偏離機(jī)制,誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生對(duì)肌凝蛋白不同程度的特異性免疫耐受

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