水產(chǎn)貝類中副溶血弧菌與創(chuàng)傷弧菌的基因檢測與分析.pdf

1、致病微生物的快速檢測與分離技術(shù)是致病微生物研究的熱點(diǎn)之一.PCR能夠快速檢測食品中存在的致病微生物,是一種有效的快速檢測手段.探針原位雜交技術(shù)可以有效的檢測和快速分離食品中存在的致病微生物.該論文采用PCR和探針原位雜交技術(shù)分離中的副溶血弧菌和創(chuàng)傷弧菌.應(yīng)用tlh探針和tdh探針檢測分離存在于貝類樣品中的副溶血弧菌,在近一個(gè)月的實(shí)驗(yàn)中有兩次tlh探針雜交結(jié)果呈陽性,共分離出了六株tlh陽性菌株,但tdh探針的檢測結(jié)果都為陰性,用PCR對

2、分離出來的六株tlh陽性菌株進(jìn)行檢驗(yàn),結(jié)果都為tlh陽性.運(yùn)用RAPD技術(shù)對六株tdh陽性菌株進(jìn)行基因分型,結(jié)果表明雖然這六株菌都為tdh陽性菌株,但在遺傳物質(zhì)上存在差異,其中菌株VPS與其它五株從青島分離出來的副溶血弧菌在基因上有較大的差異,引物oligo17獲得的多態(tài)性條帶最多,為9條.由于國內(nèi)無法將堿性磷酸酶標(biāo)記到寡核苷酸探針上,采用生物素標(biāo)記的探針來代替堿性磷酸酶標(biāo)記的探針,經(jīng)過多次的實(shí)驗(yàn),得到了與堿磷酶標(biāo)記的探針相近的雜交效果