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1、本研究的主要內(nèi)容與結(jié)果如下:1、利用同源克隆方法首次克隆得到了豬5-HT4R基因全長(zhǎng)編碼序列(CDS),同源性比較分析發(fā)現(xiàn)所獲CDS序列和所編碼的氨基酸序列與人、鼠、狗等5種動(dòng)物5-HT4R基因CDS和氨基酸序列具有高度的同源性,可以確定其屬于5-HT4R家族,進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)所獲氨基酸的C末端結(jié)構(gòu)與其它物種的5-HT4R基因b亞型的結(jié)構(gòu)相一致,因此可以確定該基因?yàn)樨i的5-HT4R基因b亞型。2、應(yīng)用生物信息學(xué)的方法預(yù)測(cè)豬5-HT4R
2、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能。結(jié)果表明豬5-HT4R是一種膜受體蛋白,屬于G蛋白偶聯(lián)受體超家族,包含一個(gè)GPCR結(jié)構(gòu)域,包括4個(gè)胞外域、7個(gè)跨膜域和4個(gè)胞內(nèi)域,分別有95、161、146個(gè)氨基酸殘基,其中跨膜域的氨基酸序列具有高度保守性,而胞內(nèi)域的C末端結(jié)構(gòu)存在很大的變異。豬與人和其他哺乳動(dòng)物的5-HT4R具有相似的氨基酸結(jié)構(gòu)和功能。3、利用半定量RT-PCR和實(shí)時(shí)熒光定量PCR兩種方法檢測(cè)豬5-HT4R基因在不同組織中的表達(dá)規(guī)律。結(jié)果發(fā)現(xiàn)其廣
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