膽紅素的提取與精制

1、膽紅素的提取精制與應(yīng)用膽紅素的提取精制與應(yīng)用摘要摘要：膽紅索是制藥工業(yè)的貴重原料，可人工工合成牛黃，合成牛黃的膽紅索要求質(zhì)量較高，因此探索膽紅素的提取方法，具有重要的科學(xué)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)利益。改進(jìn)備膽紅索鈣鹽、酸化、精制等階段，使膽紅索產(chǎn)率和純度都有明顯提高。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞：膽紅素：膽紅素、精制、精制、探索、探索、臨床應(yīng)用、臨床應(yīng)用正文：正文：一、概述膽紅素是人造牛黃的貴重原料，價(jià)格昂貴曾達(dá)25萬(wàn)元kg，現(xiàn)在市場(chǎng)價(jià)5～6萬(wàn)元kg，天然牛黃中的膽

2、紅素的含量高達(dá)50%～60%。天然牛黃中的膽紅素鈣鹽是膽汁生石的重要原因。據(jù)北大吳瑾光教授的研究發(fā)現(xiàn)人膽石中的膽紅素是和糖蛋白、多糖結(jié)合存在的；有少量的膽紅素用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿處理也不被破壞，游離膽紅素在血中濃度過(guò)高顯示毒性結(jié)合膽紅素是無(wú)毒的。據(jù)藥理實(shí)驗(yàn)證明，游離膽紅素對(duì)乙型腦炎病毒的滅活率抑制指數(shù)是去氧膽酸和膽酸的1.0～1.5倍。據(jù)日本崗奇公彥報(bào)告，膽紅素被氧化成膽綠素，成為一種有效的肝臟治療藥，他在不破壞肝組織的情況。有增殖新細(xì)胞的作用

3、，可用于血清肝炎、肝硬變的治療。膽紅素對(duì)W256瘤有較好的抑制作用。另外，膽紅索還有解熱、降壓、促進(jìn)紅血球新生等作用。我國(guó)對(duì)膽紅素的需求量很大，人造牛黃已超過(guò)100t因此，膽紅素提純方法的探索有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值。膽紅素的研制開(kāi)始于1864年，staedeler首先從膽石中分離了膽紅素。1955年我國(guó)天津育發(fā)制藥廠(chǎng)郭鞏等人從牛膽汁中提取出膽紅素；1960年武漢肉聯(lián)廠(chǎng)開(kāi)始用鈣鹽法從豬膽汁中提取膽紅素。20世紀(jì)60年代末北京同仁堂中藥提煉廠(chǎng)鄭谷棟

4、教授對(duì)提煉方法進(jìn)行了改進(jìn)；1988年先后有人提出“快速提取膽紅素新技術(shù)”，“自提膽紅素技術(shù)”等等。膽紅素的提取歸納起來(lái)主要有兩條途徑：（1）先用乙醚、乙醇提取后的膽汁剩余物。再用三氯甲烷提取膽紅素；（2）先制備膽紅素鈣鹽，鹽酸酸化，三氯甲烷提取。第（1）種途徑直接用氯仿提取，收得率低，只能達(dá)到0.0164～0.0168。因?yàn)槟懼械哪懠t素是種極易溶于水的膽紅素結(jié)合物——結(jié)合膽紅素，所以直接氯仿提取不盡合理第（2）種途徑為膽紅素鈣鹽法，其

5、收得率可增加1～2倍，但生產(chǎn)周期長(zhǎng)，相應(yīng)成本提高。二、膽紅素提取方法的探索我們對(duì)第（2）種方法進(jìn)行了反復(fù)探索，并作了一些改進(jìn)，使膽紅素的產(chǎn)率和質(zhì)量明顯提高。1、制備膽紅素鈣鹽取新鮮膽汁，80目過(guò)濾，加入4倍澄清石灰水，充分?jǐn)嚢杈鶆?，然后在攪拌下逐漸加溫，溫度升到50C，停止攪拌，55t到60C撈去白沫，65℃停止撈，繼續(xù)升溫至95℃，撈取膽紅素鈣鹽(拮紅色)。這和傳統(tǒng)方法直接加熱至沸騰撈取膽紅素鈣鹽有明顯不同。（1）石灰水的制備1份生石

6、灰和3O份清水，攪拌均勻，密閉保存24h以上。4、膽紅素臨床上的應(yīng)用應(yīng)用近來(lái)的研究表明，膽紅素在人體內(nèi)具有抗氧化作用，能清除自由基，抑制脂類(lèi)和脂蛋白過(guò)氧化，改變某些酶的活性，阻斷DNA分子，減輕氧化損傷，它與人體內(nèi)其它抗氧化防御系統(tǒng)（GSH、SOD、VITE）具有協(xié)同作用。大量研究發(fā)現(xiàn)膽紅素具有明顯抑制低密度脂蛋白的氧化修飾作用，減緩對(duì)血管內(nèi)皮的損傷，抑制血栓和泡沫細(xì)胞的生成，從而防止和降低動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生，膽紅素除本身的抗氧化作用外

7、，膽紅素還能通過(guò)抑制蛋白激酶C發(fā)揮細(xì)胞保護(hù)作用。在一定條件下，膽紅素會(huì)生成一種被稱(chēng)為肝臟生長(zhǎng)因子（LGF）的白蛋白膽紅素復(fù)合物，其對(duì)肝細(xì)胞有再生作用，Ossloa等通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，膽紅素能明顯抑制肝臟內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物的增高，阻止抗氧化酶的降低。因此，膽紅素在人體內(nèi)不僅是一種有害毒素，還是一種內(nèi)源性抗氧化劑，它在體內(nèi)主要通過(guò)清除過(guò)氧化脂質(zhì)，切斷過(guò)氧化脂質(zhì)引起的連鎖反應(yīng)，防止細(xì)胞破壞，另外膽紅素還能直接清除氧自由基，于早期階段終止自由基引起的細(xì)

8、胞損害，對(duì)心、腦、肝臟和血管等多種組織與器官具有重要的生理保護(hù)作用。由于膽紅素在體內(nèi)具有傷害與保護(hù)的雙重作用，這對(duì)我們檢驗(yàn)工作者就提出了新的標(biāo)準(zhǔn)，要求我們采用最佳方法，準(zhǔn)確定量分析膽紅素的高低值，及時(shí)反饋給臨床最新信息。近一個(gè)世紀(jì)來(lái)，臨床一直把血中高膽紅素濃度作為判斷肝膽疾病的重要指標(biāo)。自從1994年Schwertner等發(fā)現(xiàn)低膽紅素濃度可能是冠心病的新的危險(xiǎn)因子以來(lái)，許多學(xué)者作了大量有關(guān)膽紅素的研究，并隨著膽紅素檢測(cè)方法的特異性、準(zhǔn)確

9、性的提高，膽紅素與臨床疾病的關(guān)系越來(lái)越受到臨床的重視。膽紅素與冠心病近年研究表明，膽紅素具有抗氧化作用，體外實(shí)驗(yàn)證明，其抗氧化性甚至超過(guò)維生素C、維生素E等。越來(lái)越多的研究表明，低濃度膽紅素可能是冠心病新的危險(xiǎn)因子，Schwertner等通過(guò)研究指出，冠狀動(dòng)脈疾病患者由于體內(nèi)氧化活性的提高，使膽紅素的消耗量增加，從而導(dǎo)致體內(nèi)膽紅素濃度降低，此發(fā)現(xiàn)在后來(lái)的缺血性心臟病的研究中得到了證實(shí)。另外吸煙會(huì)降低膽紅素的濃度，增加脂蛋白的濃度，從而增

10、加患冠心病的機(jī)率。Hulea等報(bào)道，血清中生理濃度下的直接和間接膽紅素能有效地抑制金屬離子（如Cu2Fe2）催化的低密度脂蛋白修飾反應(yīng)，而膽紅素的這種抗低密度脂蛋白氧化修飾正是其防止動(dòng)脈粥樣硬化和降低冠心病危險(xiǎn)性的主要機(jī)制所在。有研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)膽紅素濃度下降50%，發(fā)生動(dòng)脈病變的危險(xiǎn)性就增加47%。另有報(bào)道，冠心病患者體內(nèi)膽紅素濃度不一定持續(xù)低于正常對(duì)照者，當(dāng)冠心病急性心肌梗死時(shí)其血清膽紅素濃度不但不降低反而可能會(huì)升高，因?yàn)榇藭r(shí)伴隨著血紅

11、蛋白、肌紅蛋白分解或心功能不全而引起膽紅素濃度升高。膽紅素與腦血管疾病腦出血是常見(jiàn)的腦血管疾病，腦出血后大量紅細(xì)胞破壞，破壞的紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白，并很快生成膽紅素，那么腦出血后血清膽紅素濃度升高是否是由于顱腦內(nèi)紅細(xì)胞破壞釋放出血紅蛋白而導(dǎo)致血清膽紅素濃度增高？Dohi等認(rèn)為腦出血和蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期血清膽紅素濃度顯著升高，說(shuō)明氧化應(yīng)激存在，可認(rèn)為是機(jī)體對(duì)疾病的一種保護(hù)性反應(yīng)，并認(rèn)為血清膽紅素濃度可以作為出血性中風(fēng)后一個(gè)有用的氧化應(yīng)激