草魚pIgR基因克隆表達(dá)及與IgM結(jié)合活性的研究.pdf

1、P O I Y M E R I C I M M U N O G L O B U L I N R E C E P T O R( p I g R ) I NG R A S S C A R P ( C T E N O P H A R Y N G O D O NI D E L L U S ) ：G E N E C L O N I N G , E X P R E S S I O NA N A L Y S I S A N D B I N D I N

2、 G A C T I V I T Y W I T H I g MA D i s s e r t a t i o nS u b m i t t e d t ot h e G r a d u a t e S c h o o lo f H e n a n N o r m a l U n i v e r s i t yi nP a r t i a lF u l f i l l m e n t o f t h e R e q u i r e m

3、e n t sf o r t h e D e g r e e o fM a s t e r o f A g r i c u l t u r eB yZ h a n g Y iS u p e r v i s o r ：P r o f ．K o n gX i a n g H u iM a y 2 0 1 6A B S T R A C TM u c o s a li m m u n e s y s t e m ，a st h ef i r s

4、 t l i n eo f i m m u n e d e f e n s e ，C a l lr e c o g n i z ea n dn e u t r a l i z ep a t h o g e n s ，w h i c hp l a y s a n i m p o r t a n t r o l e i n i m m u n e d e f e n s e ．P o l y m e r i ci m m u n o g l

5、 o b u l i n r e c e p t o r ( p l g R ) i sa ni m p o r t a n t i m m u n e m o l e c u l a ri nv e r t e b r a t em u c o s a l i m m u n e s y s t e m ．G r a s sc a r p ，C t e n o p h a r y n g o d o ni d e l l u si s

6、a ni m p o r t a n tc o m m e r c i a lf i s h ，w h i c hs u f f e r sm o r e d i s e a s e s i n r e c e n t y e a r s ．I nt h i ss t u d y , g e n ec l o n i n ga n de x p r e s s i n ga n a l y s i so fp l g R ，a sw e

7、 l la sc o m b i n i n gw i t hI g M w e r es t u d i e di n g r a s sc a r p ，t h ea i m i s t oc l e a rm o l e c u l a r c h a r a c t e r i s t i c sa n de x p r e s s i o nd i f f e r e n c ei ng r a s sc a r pa n d

8、t Op r o v i d es o m eb a s i ck n o w l e d g et Oi m p r o v e t h e i m m u n e l e v e lI n t h i s s t u d y , t h e p l g Rc D N Ac o m p l e t e s e q u e n c ew a sa c h i e v e dt h r o u g hR T - P C R ，3 ’R A

9、 C E a n d5 ’R A C E ，w i t ht h ef u l l —l e n g t hs e q u e n c eo f16 6 7b p ，w h i c hc o n t a i n sa 10 0 8 b po p e nr e a d i n gf l a m e ( O p e nr e a d i n gf l a m e ，O R F ) ，e n c o d i n g a3 3 6 a m i

10、n oa c i d ，5 ’u n t r a n s l a t e dr e g i o n i s 7 7b p ，a n d3 ’u n t r a n s l a t e d r e g i o ni s 5 7 9b p ．T h ed e d u c e dp l g Ra m i n oa c i ds e q u e n c e c o n s i s t s o fe x t r a c e l l u l a r

11、 d o m a i n ，at r a n s m e m b r a n ed o m a i n ，i n t r a c e l l u l a rd o m a i n ，w i t ht h ep r e d i c t e dm o l e c u l a rw e i g h to f 3 7 ．2 2k D a ，t h e s i g n a lp e p t i d eo f2 2a m i n o a c i d

12、 sa n d t w o I L D si n t h e e x t r a c e l l u l a rd o m a i nB a s e do n t h ee x t r a c t e dt o t a lR N A ，o f e i g h tk i n d so ft i s s u e ( s k i n ，m u s c l e ，g i l l ，l i v e r , s p l e e n ，i n t e

13、 s t i n e ，h e a d k i d n e ya n d h e a r t ) ，u s i n gr e a l —t i m eq u a n t i t i e sP C R t or e s e a r c ht h ep l g R m R N A e x p r e s s i o ni n d i f f e r e n tt i s s u e s ．T h er e s u l ts h o w e

14、dt h a tt h em R N A e x p r e s s i o nl e v e lo fp l g Rw a st h eh i g h e s t i n i n t e s t i n e ，f o l l o w e db y h i g h e re x p r e s s i o ni ns p l e e n ，a n di t a l s oe x p r e s s e d i n s k i n ，g

15、i l l ，l i v e ra n d h e a dk i d n e ya n d m u s c l e ．I tw a ss u g g e s t e dt h a t t h e i n t e s t i n c e n r i c h t h em o l ei n t e s t i n a l m u c o s a a n dt h e s p l e e n i s t h em a i np e r i p