大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)不育大鼠生殖系統(tǒng)修復(fù)作用的研究.pdf

1、現(xiàn)代社會(huì)的發(fā)展為人們的生活提供了豐富的物質(zhì)保證，但同時(shí)人類生殖健康卻因環(huán)境改變、生活節(jié)奏加快和壓力增大而不斷惡化。其中由于男性因素造成的不孕不育呈明顯的上升趨勢(shì)，少精、弱精和無精癥是男性不育的主要原因。要從根本上治療男性不育癥，干細(xì)胞是理想的種子細(xì)胞，干細(xì)胞移植是解決這一難題的根本方法。
　　 胚胎干細(xì)胞具有分化為精原干細(xì)胞的能力，但由于其來源有限、移植于體內(nèi)的成瘤性、免疫排斥性以及社會(huì)倫理道德的制約等限制了其在臨床中的應(yīng)用，骨

2、髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs)是存在于骨髓中一種非造血組織的間充質(zhì)干細(xì)胞，其儲(chǔ)量豐富、取材方便、避免了異體免疫排斥反應(yīng)，在特定誘導(dǎo)條件下可以向三胚層細(xì)胞分化，而骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是否能夠分化為雄性生殖細(xì)胞，目前少見研究報(bào)道。為此，本研究比較了60mg/kg、40mg/kg、30mg/kg、20mg/kg、15mg/kg不同劑量白消安、單次和連續(xù)多次注射白消安制備大鼠無精癥模型的效

3、果。檢測(cè)了注射后不同時(shí)間大鼠睪丸重量、睪丸組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)、精子密度、活力、畸形率等。同時(shí)體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，免疫組化檢測(cè)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面抗原CD44和CD106、生殖細(xì)胞表面抗原c-kit基因的表達(dá)，將培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植到無精癥大鼠睪丸曲細(xì)精管中，移植后30d檢測(cè)睪丸組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)、免疫組化檢測(cè)了CD106、CD44、c-kit基因在睪丸組織細(xì)胞中的表達(dá)。結(jié)果表明：單次注射白消安各組大鼠10d內(nèi)全部死亡。連續(xù)10d腹腔

4、注射白消安累計(jì)劑量為20mg/kg(體重)組大鼠全部存活，注射后睪丸形態(tài)變小、重量減輕，到30d時(shí)重量僅為0.49g，對(duì)照組為0.97g，二者間有明顯差別。注射白消安30d后睪丸組織中曲細(xì)精管內(nèi)壁僅有1-2層支持細(xì)胞，管腔中央少見細(xì)胞，對(duì)照組睪丸曲細(xì)精管管腔中可見大量的生殖細(xì)胞，二者間有顯著差別。從大鼠股骨腔成功分離培養(yǎng)了骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，免疫組化結(jié)果顯示CD44表達(dá)陽性、CD106表達(dá)陽性、c-kit表達(dá)陰性。將大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞注