骨髓間充質(zhì)干細胞對大鼠足細胞損傷的保護作用的研究.pdf

1、目的：探討大鼠BMSCs對大鼠腎臟足細胞損傷的保護作用研究。
　　方法：1.從SD大鼠骨髓中提取MSCs，經(jīng)體外擴增、純化并進行鑒定。2.從SD大鼠腎臟中提取足細胞，經(jīng)體外培養(yǎng)、并進行鑒定。3.體外實驗，分組：正常組：足細胞；阿霉素組：足細胞+阿霉素(2ug/ml)；干細胞組：足細胞+BMSCs（共培養(yǎng)24h）+阿霉素(2ug/ml)。各實驗組干預24h、48h、72h后通過流式細胞術(shù)檢測各組足細胞的凋亡率。12h、24h、48h

2、后通過RT-PCR和Real time PCR測nephrin、synaptopodin mRNA的表達。Western bolt技術(shù)檢測各組24h、48h、72h足細胞骨架相關(guān)蛋白nephrin、synap topod in的表達。
　　結(jié)果：1.流式細胞儀結(jié)果示：24h正常組凋亡率為19.1％，24h阿霉素組凋亡率為45.4%，24h干細胞組凋亡率為22.7%，24h干細胞組與阿霉素組相比足細胞的凋亡顯著減少，減少有統(tǒng)計學意義

3、（P<0.01）。48h正常組凋亡率為22.4%，48h阿霉素組凋亡率為32.5%，48h干細胞組凋亡率為26.2%，48h干細胞組與阿霉素組相比足細胞的凋亡減少，減少無統(tǒng)計學意義（P>0.05）.72h正常組凋亡率為17.7%，72h阿霉素組凋亡率為29.6%，72h干細胞組凋亡率為28.7%，72h干細胞組與阿霉素組相比足細胞的凋亡減少，減少無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　2.RT-PCR電泳示：12h、24h、48h各時

4、間點正常組、阿霉素組和干細胞組nephrin mRNA的表達無明顯差異。24h和48h阿霉素組和干細胞組synaptopodin mRNA的表達比正常組減少，24h和48h干細胞組synaptopodin mRNA的表達比阿霉素組明顯增加。
　　3.Real time PCR結(jié)果示：12h、24h、48h各時間點正常組、阿霉素組和干細胞組nephrin mRNA的表達無明顯差異。48h阿霉素組和干細胞組synaptopodin m

5、RNA的表達比正常組減少，48h干細胞組synaptopodin mRNA的表達比阿霉素組明顯增加,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　4.Western bolt結(jié)果示：24h、48h、72h正常組、阿霉素組和干細胞組nephrin蛋白的表達無明顯差異。48h干細胞組與阿霉素組相比synaptopodin蛋白表達明顯增高，24h、72h正常組、阿霉素組和干細胞組synaptopodin的表達無明顯差異。
　　結(jié)論：1.