LPS誘導細胞損傷對細胞表面唾液酸影響的初步研究.pdf

1、已有研究表明，唾液酸是一種重要的糖物質，位于細胞表面糖綴合物的最末端，在細胞粘附、識別、炎癥反應以及腫瘤細胞的轉移過程中起著重要作用。血管內皮細胞表面唾液酸的改變與心血管疾病、癌癥等疾病的發(fā)生及發(fā)展緊密相關。因此對細胞表面唾液酸以及其相關的唾液酸糖基轉移酶的功能研究具有重要的意義。
　　本論文利用LPS誘導細胞，建立血管內皮細胞損傷模型，在此基礎上，使用凝集素SNA及MAA對細胞表面唾液酸進行熒光標記，并利用流式細胞術與激光共聚焦

2、顯微鏡對細胞損傷后其表面唾液酸變化進行分析。結果表明，1-10μg/mL的LPS處理可引起細胞的部分損傷。SNA結合唾液酸的流式結果顯示，當LPS處理4 h時，α-2,6唾液酸含量略有降低，其中10μg/mL LPS處理組的熒光強度比對照組降低了31％。當LPS處理24h時，α-2,6唾液酸含量顯著增加，其中10μg/mL LPS處理組的熒光強度比對照組升高了119%。該結果與SNA染色的激光共聚焦結果相一致。MAA結合唾液酸的流式結果

3、顯示，當LPS處理4h時，α-2,3唾液酸含量也存在降低趨勢，其中1μg/mL LPS處理組的熒光強度比對照組降低了42%。當LPS處理24h時，10μg/mL LPS處理組的α-2,3唾液酸的熒光強度比對照組升高了37%。該結果與MAA染色的激光共聚焦結果相一致。
　　在獲得細胞損傷后細胞表面唾液酸的變化情況后，我們初步研究唾液酸相關的糖基轉移酶變化情況。qRT-PCR結果表明，LPS處理細胞后，細胞的ST3-1、ST3-4及S