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1、中圖分類號:中圖分類號:R73;R78;R97碩士學位論文青蒿素逆轉(zhuǎn)口腔鱗癌Tca8113細胞耐藥的相關性研究院(系)、所院(系)、所臨床醫(yī)學院研究生姓名研究生姓名楊瑤瑤學科、專學科、專業(yè)臨床病理學導師姓導師姓名龔莉教授學位類型學位類型專業(yè)學位青蒿素逆轉(zhuǎn)口腔鱗癌Tca8113細胞耐藥的相關性研究摘要目的:通過體外加藥誘導的方法建立耐化療藥物卡鉑(Ka)的人口腔鱗癌Tca8113細胞模型,觀察耐卡鉑(Ka)的人口腔鱗癌Tca8113細胞的
2、耐藥相關基因Pgp、GSTπ的表達變化,再用中藥青蒿素干預耐卡鉑(Ka)的口腔鱗癌Tca8113細胞,對比前后耐藥基因Pgp、GSTπ的變化,以及相應蛋白表達的變化,從而探討青蒿素逆轉(zhuǎn)口腔鱗癌Tca8113細胞耐藥的相關性研究。方法:1、體外誘導人口腔鱗癌Tca8113細胞耐藥細胞株的建立。本次實驗采用的化療藥物為卡鉑(Ka),誘導方法采用小劑量長期間暴露法逐漸增加藥物的濃度。2、采用細胞免疫化學的方法檢測耐藥細胞株中耐藥相關基因Pgp
3、、GSTπ的表達變化。3、體外培養(yǎng)耐卡鉑(Ka)的Tca8113細胞,用不同濃度(0μgml、12.5μgml、25μgml、50μgml、100μgml)的青蒿素作用于耐藥細胞(24、48、72小時)后,用CCK8法檢測各組中青蒿素對耐藥細胞增殖活性的影響;用RTPCR技術檢測不同濃度青蒿素(0μgml、12.5μgml、25μgml、50μgml、100μgml)作用于耐藥細胞中Pgp、GSTπ在mRNA表達水平上的變化;用West
4、ernblot技術檢測不同濃度青蒿素(0μgml、12.5μgml、25μgml、50μgml、100μgml)作用于耐藥細胞Pgp、GSTπ在蛋白表達水平上的變化。結(jié)果:1、細胞免疫化學結(jié)果顯示,Pgp和GSTπ在耐卡鉑(Ka)的Tca8113細胞的陽性表達率遠高于Tca8113細胞,可以認為耐卡鉑(Ka)的Tca8113細胞和Tca8113細胞相比,Pgp和GSTπ的表達均升高(P=0.018,P=0.020,P<0.05)。2、C
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