升陽(yáng)益胃湯阻斷萎縮性胃炎大鼠細(xì)胞TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究.pdf

1、目的：本課題通過(guò)升陽(yáng)益胃湯對(duì)大鼠CAG模型進(jìn)行干預(yù)，觀察該方阻斷萎縮性胃炎大鼠細(xì)胞TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的效果，研究其治療慢性萎縮性胃炎的作用機(jī)制，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)有效新藥奠定前期基礎(chǔ)。
　　方法：本課題實(shí)驗(yàn)采用理化因素制模法建立大鼠CAG模型，取SPF級(jí)成年Wister大鼠90只，體重200±20g，雌雄各50只，給予其正常喂食三天后，隨機(jī)抽取10只，雌雄各半，作為正?？瞻讓?duì)照組,余下80只均采用用0.05％氨水、10mmol/L去氧

2、膽酸鈉、30%酒精與2%水楊酸混合液及免疫方法配合饑飽失常建立大鼠CAG模型，連續(xù)10周。于造模第7周隨機(jī)將80只大鼠分為模型組、硫糖鋁對(duì)照組、升陽(yáng)益胃湯低劑量干預(yù)組、升陽(yáng)益胃湯中劑量干預(yù)組、升陽(yáng)益胃湯高劑量干預(yù)組、升陽(yáng)益胃湯低劑量治療組、升陽(yáng)益胃湯中劑量治療組、升陽(yáng)益胃湯高劑量治療組，每組10只（雌雄各5只），其中模型組及各劑量治療組只造模，硫糖鋁對(duì)照組予以硫糖鋁灌胃，各劑量干預(yù)組則在造模的同時(shí)，以不同劑量的升陽(yáng)益胃湯予干預(yù)治療，經(jīng)過(guò)

3、4周造模后，于造模第10周末將模型組中大鼠10只處死取胃組織病檢，確認(rèn)造模成功后，除各劑量治療組外均予處死采集樣本，送檢空白組、模型組、硫糖鋁對(duì)照組、低劑量干預(yù)組、中劑量干預(yù)組、高劑量干預(yù)組大鼠的胃黏膜組織，各劑量治療組則在造模成功后，繼續(xù)治療4周后處死，取出胃黏膜組織。對(duì)取出的組織采用RT-PCR法及Western-blot法檢測(cè)TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB、I-κB等指標(biāo)的基因和蛋白的表達(dá)，同時(shí)對(duì)所得出的結(jié)果進(jìn)行分析，

4、從而判斷升陽(yáng)益胃湯對(duì)大鼠CAG模型胃黏膜組織TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。
　　結(jié)果：
　　1、成功建立大鼠CAG模型；
　　2、模型組的各項(xiàng)指標(biāo)的基因表達(dá)和蛋白表達(dá)與空白對(duì)照組有明顯的差異，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01),并伴有大鼠胃黏膜組織萎縮，炎細(xì)胞組織浸潤(rùn)，少數(shù)甚至還伴有腸上皮化生等癌前病變；
　　3、硫糖鋁對(duì)照組與模型組相比，TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB、I-κB的基因表達(dá)與蛋白的表達(dá)

5、均有明顯差異（P<0.01）；
　　4、各劑量升陽(yáng)益胃湯干預(yù)組及治療組的TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB基因表達(dá)及蛋白表達(dá)隨著濃度的上升而逐漸下降，且通過(guò)前期的實(shí)驗(yàn)觀察及大鼠胃黏膜組織的觀察也可以看出隨著升陽(yáng)益胃湯的濃度增高，大鼠的整體情況及胃黏膜病理組織學(xué)均有明顯改善；
　　結(jié)論：
　　1、利用理化因素制模法10周可以成功建立大鼠CAG模型；
　　2、 TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB、I-