新型釕配合物的合成及抗腫瘤活性研究.pdf

1、惡性腫瘤是當(dāng)前危害人類健康的主要疾病之一。長(zhǎng)期以來，尋找用于惡性腫瘤治療的藥物一直是全世界藥物研發(fā)的熱點(diǎn)，上世紀(jì)六十年代，人類發(fā)現(xiàn)了一類無機(jī)化合物鉑類配合物的抗癌活性。如今，鉑類藥物已經(jīng)被應(yīng)用于85％的腫瘤治療方案中。金屬釕配合物被認(rèn)為是最具有發(fā)展?jié)摿Φ目鼓[瘤藥物之一。但是，在鉑類藥物的臨床使用過程中，其缺點(diǎn)也開始日益凸顯，其毒副作用如腎毒性、骨髓毒性、耳毒性、外周神經(jīng)毒性、催吐性及長(zhǎng)期使用產(chǎn)生的耐藥性等，以及鉑類藥物對(duì)一些腫瘤的治療無

2、效，這使其應(yīng)用受到限制。因此，尋找新的抗腫瘤金屬配合物引起了更多研究者的關(guān)注。
　　本課題通過設(shè)計(jì)合成不同釕金屬配合物，研究其生物活性，經(jīng)過篩選得到了14種具有較強(qiáng)抗腫瘤活性的釕金屬配合物，使用MTT檢測(cè)、配合物的內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)、吖啶橙和溴化乙啶雙染實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期檢測(cè)試驗(yàn)、細(xì)胞活性氧水平檢測(cè)試驗(yàn)、線粒體膜電位檢測(cè)、單細(xì)胞凝膠電泳檢測(cè)、蛋白免疫印跡法等實(shí)驗(yàn)方法，通過對(duì)Bel-7402、Mg-63、A549、SK-BR-3、Hela等腫瘤細(xì)

3、胞的作用研究，初步證實(shí)這些新型釕配合物具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用，并在此基礎(chǔ)上試圖探討配合物誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡的相關(guān)機(jī)理。
　　以下將分章介紹研究的具體內(nèi)容。
　　第一章前言以釕金屬配合物為主介紹金屬配合物的研究及應(yīng)用現(xiàn)狀。
　　第二章合成新型配體CPIP，并與五個(gè)輔助配體bpy、phen、dmb、dip、dmp反應(yīng)合成五個(gè)新的釕金屬配合物，分別簡(jiǎn)稱為C1、C2、C3、C4、C5。檢測(cè)配合物對(duì)NIH-3T3、Bel-74

4、02、Mg-63、A549、SK-BR-3五種細(xì)胞的抑制作用。發(fā)現(xiàn)這些化合物對(duì)Bel-7402細(xì)胞的IC50較低。通過內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)結(jié)果、吖啶橙和溴化乙錠雙染實(shí)驗(yàn)結(jié)果和線粒體膜電位檢測(cè)結(jié)果可以初步判斷，配合物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并通過線粒體途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
　　第三章合成新型配體DCPIP，并與五個(gè)輔助配體bpy、phen、dmb、dip、dmp反應(yīng)合成五個(gè)新的釕金屬配合物，分別簡(jiǎn)稱為D1、D2、D3、D4、D5。檢測(cè)配合物對(duì)NIH-3T3、

5、Bel-7402、Mg-63、A549、SK-BR-3五種細(xì)胞的抑制作用。發(fā)現(xiàn)這些化合物對(duì)Bel-7402細(xì)胞的IC50較低。內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)配合物進(jìn)入Bel-7402細(xì)胞的內(nèi)部，活性氧及線粒體膜電位實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，這些配合物通過線粒體途徑引起B(yǎng)el-7402細(xì)胞凋亡。
　　第四章合成新型配體ATATP，并與四個(gè)輔助配體bpy、dmb、phen、dmp反應(yīng)合成四個(gè)新的釕金屬配合物，分別簡(jiǎn)稱為M1、M2、M3、M4。檢測(cè)這些配合物對(duì)于NI

6、H-3T3、Bel-7402、Mg-63、A549、Hela五種細(xì)胞的抑制作用。發(fā)現(xiàn)這些配合物對(duì)于Hela細(xì)胞的IC50較低。染色結(jié)果顯示，化合物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，活性氧及線粒體膜電位實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，其誘發(fā)細(xì)胞凋亡的途徑也是線粒體途徑。
　　第五章通過蛋白免疫印跡法、單細(xì)胞凝膠電泳等方法重點(diǎn)研究C4和D1誘導(dǎo)Bel-7402細(xì)胞凋亡的相關(guān)機(jī)理，研究M1誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡的相關(guān)機(jī)理。結(jié)果顯示，Bcl-2、Bcl-x等蛋白表達(dá)量下調(diào)，Ca