艾塞那肽通過(guò)調(diào)節(jié)脂聯(lián)素及其受體、氧化應(yīng)激和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)高糖培養(yǎng)心肌細(xì)胞產(chǎn)生保護(hù)作用.pdf

1、目的：觀察艾塞那肽對(duì)高糖培養(yǎng)心肌細(xì)胞脂聯(lián)素及其受體1（AdipoR1）、氧化應(yīng)激及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響,探討艾塞那肽對(duì)心肌細(xì)胞保護(hù)作用及機(jī)制。
　　方法：將H9C2心肌細(xì)胞隨機(jī)分為4組（每組n=3）：對(duì)照組（A組，5.6 mmol/L糖培養(yǎng)基）、高糖組（B組，25.5 mmol/L糖培養(yǎng)基）；高糖+10 nmol/L艾塞那肽組(C組)；高糖+100nmol/L艾塞那肽組（D組）。按分組處理24 h后檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。用酶聯(lián)免疫吸附法(E

2、LISA)測(cè)定心肌細(xì)胞上清液脂聯(lián)素(Adiponectin)水平。用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)測(cè)定煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADPH）氧化酶亞單位p22phox(nicotinamide adenine dinucleotide(NADPH) oxidase subunit,p22phox)、核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor E2-related factor2,Nrf2）、血紅素加氧酶-1(heme o

3、xygenase-1,HO-l)、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP-78）、和CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白（C/EBP homologous protein, CHOP）mRNA表達(dá)。用免疫印跡法(Western Blot)測(cè)定心肌細(xì)胞 AdipoR1、磷酸化 AMP激活蛋白激酶-α（Phosphorylated AMP activated protein kinase，P-AMPK)和葡

4、萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)因子4（Glucose transporter4,GLUT4）蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：⑴與A組比較，B組心肌細(xì)胞凋亡率升高（25.90±0.55比5.60±0.25；χ2=10.958， P<0.05)，心肌細(xì)胞脂聯(lián)素、AdipoR1和P-AMPK、GLUT4蛋白表達(dá)、Nrf2和HO-1mRNA表達(dá)水平均顯著降低（760±145比1490±168；0.59±0.08比0.91±0.07；0.59±0.26比0.85±0.03

5、；0.63±0.08比0.86±0.08；0.56±0.02比1.00±0.00；0.48±0.08比1.00±0.00；t=7.942、6.922、13.255、4.536、10.689、13.627，均P<0.05），p22phox蛋白表達(dá)、GRP-78和CHOP mRNA表達(dá)水平升高（0.87±0.02比0.56±0.09；1.33±0.08比1.00±0.00；1.58±0.16比1.00±0.00；t=7.591、5.138、

6、5.994，均P<0.05）。⑵C組心肌細(xì)胞凋亡率為12.2±2.2，低于B組（χ2=6.814，P<0.05）；脂聯(lián)素、AdipoR1和P-AMPK、GLUT4蛋白表達(dá)、Nrf2和HO-1 mRNA水平分別為1070±142、0.69±0.02、0.72±0.03、0.78±0.08、0.71±0.09、0.64±0.07，高于B組（t=3.372、2.263、6.477、2.897、3.633、4.225，均P<0.05）；而p22

7、phox蛋白（0.66±0.04）、GRP-78mRNA（0.99±0.16）和CHOP mRNA表達(dá)（1.26±0.28）低于B（t=4.716、4.892、3.272，均P<0.05）。⑶D組心肌細(xì)胞凋亡率（8.7±0.8）低于C組（χ2=2.265，P<0.05）；脂聯(lián)素（1306±178）、AdipoR1蛋白（0.82±0.09）和P-AMPK蛋白（0.88±0.20）、Nrf2 mRNA水平(0.91±0.11)和HO-1mR

8、NA水平(0.88±0.08)高于C組（t=2.575、2.349、7.822、4.792、6.518，均P<0.05），CHOP mRNA表達(dá)（0.96±0.09）低于C組（t=3.185，P<0.05）。而p22phox蛋白（0.60±0.14）和GLUT4蛋白（0.89±0.05）、GRP-78mRNA（1.10±0.12）較C組無(wú)明顯變化（t=1.323、1.702、1.348，均P>0.05）
　　結(jié)論：①高糖培養(yǎng)的心肌