反左金丸抗腫瘤和抗轉移的機制研究.pdf

1、惡性腫瘤是危害人類健康最嚴重的疾病之一，在我國常見致死病因中已占居首位。目前腫瘤治療多采用化療手段，但化療有著自身的缺陷，如：毒副作用大、易產生多藥耐藥等，因此，越來越多的人開始把目光重新投向傳統(tǒng)的中醫(yī)藥療法。左金丸源于《丹溪心法》，由黃連和吳茱萸按6：1組成，有清肝瀉火，降逆止嘔功效，現(xiàn)代藥理研究表明左金丸對胃癌有較好的防治作用，但其應用缺乏依據(jù)。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，黃連和吳茱萸按1：6組成反左金丸在防治腫瘤中更有優(yōu)勢。本文從整體，分子

2、和細胞三個水平評價左金丸、反左金丸及在反左金丸基礎上添加商陸和肉桂組成的加味復方抗腫瘤的功效，為反左金丸用于腫瘤防治提供理論支持。
　　本課題體外實驗采用MTT法檢測不同濃度的左金丸、反左金丸及復方酒浸液對人肺癌細胞（A549）增殖的影響；劃痕實驗觀察三種藥物對腫瘤細胞遷移能力的影響；AO染色檢測三種藥物對饑餓狀態(tài)下腫瘤細胞自噬的影響。體內實驗采用H22肝癌小鼠皮下移植模型、lewis實驗性肺癌轉移小鼠模型和烏拉坦誘導的小鼠肺癌模

3、型，評價左金丸、反左金丸及加味復方藥粉和水煎液對腫瘤的預防及治療作用，通過對荷瘤小鼠的精神狀態(tài)、體溫、生存率和自主活動的觀察，評價藥物對實驗小鼠中醫(yī)學體征的影響；通過肺組織HE染色觀察藥物對肺癌小鼠肺癌組織病理學的影響，并檢測實驗小鼠血清中APT、AFu、GP-73、SOD、MDA和LDH等含量的變化。另外，本文也通過蛋白印跡法，觀察受試藥物對Nanog、Oct3腫瘤干細胞標記物表達的影響。
　　體外結果顯示：左金丸、反左金丸和加

4、味復方酒浸液都呈劑量相關性抑制A549肺癌細胞增殖，其 IC50分別為47.3，39.1，32.6μg/ml；三者對細胞遷移都有抑制作用，相同劑量下反左金丸和加味復方能更有效地抑制腫瘤細胞遷移。另外，反左金丸和加味復方還能顯著抑制腫瘤細胞饑餓狀態(tài)下的自噬。
　　體內實驗結果顯示：反左金丸和加味復方均能抑制腫瘤生長和轉移，預防腫瘤發(fā)生，維持小鼠體溫恒定，提高小鼠生存質量，降低血清中APT、AFu、GP-73、MDA和LDH水平，提高