MGMT啟動(dòng)子甲基化與前列腺癌化療敏感性的關(guān)系.pdf

1、目的:研究MGMT基因在前列腺癌細(xì)胞系LNCap和DU145中的啟動(dòng)子的甲基化情況，及其與前列腺癌化療敏感性的關(guān)系。
　　研究方法:選取2種前列腺癌細(xì)胞系LNCap和DU145和常用化療藥物紫杉醇和順鉑。應(yīng)用Illumina Human甲基化450K芯片，檢測(cè)紫杉醇處理48小時(shí)前后前列腺癌細(xì)胞全基因組基因啟動(dòng)子甲基化情況。應(yīng)用PCR和western blot方法檢測(cè)兩種前列腺癌細(xì)胞系中MGMT基因表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水平。應(yīng)用甲基化

2、特異性PCR(MSP)方法檢測(cè)兩種前列腺癌細(xì)胞系LNCap和DU145中MGMT啟動(dòng)子的甲基化情況。應(yīng)用western blot檢測(cè)去甲基化藥物地西他濱(DAC)處理前后，前列腺癌細(xì)胞中MGMT的蛋白表達(dá)。應(yīng)用CCK8分析在前列腺癌細(xì)胞中MGMT啟動(dòng)子甲基化對(duì)順鉑和紫杉醇的化療敏感性的影響。
　　結(jié)果:在2種前列腺癌細(xì)胞的比較中，MGMT基因啟動(dòng)子甲基化在DU145中較LNCap更高。LNCap細(xì)胞中的MGMT基因表達(dá)和蛋白表達(dá)均

3、高于DU145細(xì)胞。兩種前列腺癌細(xì)胞在紫杉醇處理前后，MGMT啟動(dòng)子甲基化沒有明顯改變。地西他濱作用兩種前列腺癌細(xì)胞系，MGMT基因啟動(dòng)子甲基化有明顯的去甲基化改變。同時(shí)，地西他賓可以使前列腺癌細(xì)胞中MGMT的表達(dá)發(fā)生改變。DAC處理前列腺癌細(xì)胞后，可以使順鉑和紫杉醇的化療效果發(fā)生改變。
　　結(jié)論:本研究揭示了DAC可以降低前列腺癌細(xì)胞中MGMT基因啟動(dòng)子甲基化水平，并可以增加MGMT的蛋白表達(dá)。紫杉醇對(duì)前列腺癌細(xì)胞中MGMT啟動(dòng)