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文檔簡介
1、目的:1、通過Aβ1-42激活BV2細胞建立阿爾茨海默病小膠質細胞炎性模型。2、通過檢測IL-1β,TNF-α的表達,預測Aβ1-42誘導的BV2細胞炎性反應過程。3、姜黃素預處理后檢測IL-1β,TNF-α的表達,判斷Aβ1-42誘導BV2細胞炎性反應過程的變化。
方法:1、BV2小鼠小膠質瘤細胞培養(yǎng)。2、模擬阿爾茨海默病小膠質細胞炎性模型,用不同濃度的Aβ1-42誘導細胞活化,通過MTT檢測BV2細胞的活力及酶聯(lián)免疫吸附試
2、驗(ELISA)檢測炎性反應過程中IL-1β及TNF-α的分泌。選擇適宜濃度Aβ1-42進行相關實驗。3、應用該濃度Aβ1-42處理BV2細胞,通過細胞免疫組化來判斷BV2細胞是否被激活。4、應用該濃度Aβ1-42處理BV2細胞,不同時間酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測炎性反應過程中IL-1β及TNF-α的分泌。選擇適宜時間進行相關實驗。5、用不同濃度的姜黃素與活化的BV2細胞共培養(yǎng),并將其分為空白組(培養(yǎng)基+MTT),對照組(細胞+
3、培養(yǎng)基+MTT)、實驗組1(Aβ1-42+細胞+培養(yǎng)基+MTT)組、實驗組2(Aβ1-42+姜黃素+細胞+培養(yǎng)基+MTT),應用MTT法鑒定細胞活力,酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測炎性反應過程中IL-1β及TNF-α的分泌。
結果:-1、10umolAβ1-42預處理BV2細胞12h,可模擬阿爾茨海默病小膠質細胞炎性反應過程。2、Aβ1-42+姜黃素組IL-1β,TNF-α的表達較Aβ1-42組明顯受到抑制(p<0.05)
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