MicroRNA-25對(duì)IL-1β-誘導(dǎo)軟骨降解及炎性反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：探討 miR-25在白細(xì)胞介素1β（IL-1β）促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)降解和炎性因子合成的調(diào)控作用以及骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞凋亡和增殖影響。
　　方法：木瓜蛋白酶膝關(guān)節(jié)腔注射誘導(dǎo)骨性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型和SD大鼠骨性關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞原代培養(yǎng)。IL-1β體外刺激OA軟骨細(xì)胞，模擬骨性關(guān)節(jié)炎體外環(huán)境。MiR-25 mimic或inhibitor轉(zhuǎn)染至OA軟骨細(xì)胞。利用RT-qPCR和/或蛋白質(zhì)印跡法分別檢測(cè) miR-25，ACAN，Col2a1，TN

2、F-α，MMP-13表達(dá)水平。利用AnnexinV-FITC/PI和CCK-8法檢測(cè)軟骨細(xì)胞細(xì)胞凋亡和細(xì)胞增殖。
　　結(jié)果：IL-1β刺激正常軟骨細(xì)胞、骨性關(guān)節(jié)炎細(xì)胞比無IL-1β刺激對(duì)照組中miR-25表達(dá)水平顯著增高（P<0.05）。MiR-25過表達(dá)轉(zhuǎn)染組明顯抵消了 IL-1β抑制ACAN和Col2a1 mRNA轉(zhuǎn)錄（P<0.05）。相反，miR-25低表達(dá)轉(zhuǎn)染組明顯促進(jìn)IL-1β抑制ACAN和Col2a1 mRNA轉(zhuǎn)錄作用

3、（P<0.05）；miR-25過表達(dá)轉(zhuǎn)染組下調(diào) MMP-13和 TNF-α表達(dá)，而 miR-25低表達(dá)轉(zhuǎn)染組促進(jìn) MMP-13和TNF-α表達(dá)上調(diào)（P<0.05）；miR-25過表達(dá)明顯抑制軟骨細(xì)胞凋亡而miR-25低表達(dá)促進(jìn)軟骨細(xì)胞凋亡（P<0.05）；miR-25 mimic促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖而 miR-25 inhibitor組抑制軟骨細(xì)胞增殖（P>0.05）。
　　結(jié)論：miR-25介導(dǎo)OA疾病發(fā)生、進(jìn)展中發(fā)揮著保護(hù)性調(diào)節(jié)作