丹參酮ⅡA治療肌腱粘連的動物實驗及臨床研究.pdf

1、研究背景:
　　肌腱粘連是指肌腱損傷修復過程中周圍組織的增生和侵入，造成肌腱運動功能障礙。外傷術后肌腱粘連是肌腱損傷后常見問題之一，迄今為止仍無有效的解決方法，仍大概有30～40％的病人術后有關節(jié)活動度不佳，手功能受限等并發(fā)癥[1]。我們希望通過深入肌腱粘連機制的研究來解決這一問題。肌腱粘連發(fā)生的原因可能為機械性和化學性的損傷。損傷誘發(fā)間質細胞和肥大細胞釋放多種活性物質，使組織產生炎性反應，毛細血管通透性增加，大量漿液滲出。這些滲

2、出物如不能被分解吸收，則促使纖維蛋白積聚，繼而發(fā)生纖維細胞浸潤和新生毛細血管的長入，最后形成纖維粘連[2]。目前認為肌腱的愈合由內、外兩種修復機制完成。內源性修復機制指通過肌腱細胞增生修復損傷肌腱;外源性修復機制指通過腱周組織增生，纖維母細胞，炎癥細胞的增生修復損傷肌腱。肌腱自身的強度主要取決于內源性修復機制;而外源性修復則主要形成粘連[3，4]。由于炎性反應導致局部組織滲出增多，炎性后的機化后更加重肌腱的粘連，這就是肌腱外源性修復容易

3、廣泛粘連的主要問題[5]。TGF-β1/Smad3是創(chuàng)傷修復過程中的重要信號通路。TGF-β1是各種損傷后組織發(fā)生病理性纖維化的因素之一。目前實驗發(fā)現(xiàn)在肌腱損傷時TGF-β1可刺激腱細胞DNA合成，促進腱細胞增殖參與肌腱的修復，促使成纖維細胞和巨噬細胞的募集、血管的生成、刺激膠原的產生[6]。丹參酮ⅡA，TanshinoneⅡA，為唇形科鼠尾草屬植物丹參(Salviamiltior-rhiza bunge)的有效成份具有抗菌、消炎、擴張

4、血管、抗血小板凝集等作用來治療冠心病等心血管疾病[7-9]。我們研究TSA是否可以有效的防止肌腱粘連和其可能作用機制，包括微小RNA(miRNA)及通過TGF-β/Smad信號通路的蛋白表達，并且進一步驗證并運用于臨床。本研究的成功實施將為肌腱功能修復提供了新的理論和途徑。
　　第一部分丹參酮ⅡA治療肌腱粘連的動物實驗研究
　　背景:
　　肌腱表面和腱鞘之間的肌腱粘連是一種常見的臨床問題。雖然骨科修復技術和康復治療進步

5、使肌腱粘連得到一定的改善，但仍然無法徹底根治。丹參酮ⅡA(TSA)是因為它的抗炎活性作為主要功能活性的植物化學物質之一。我們用丹參酮ⅡA(TSA)在大鼠的跟腱損傷模型中來防止肌腱粘連的和通過TGF-β/Smad信號通路研究可能的作用機制，包括微RNA（miRNA）的表達和蛋白質表達。
　　方法:
　　建立SD大鼠的跟腱損傷模型，肌腱損傷處通過改良Kessler的技術縫合，隨機分為TSA和對照組。肌腱斷端用TSA進行干預，并用

6、生理鹽水作為對照。6周后對肌腱組織進行大體觀察和組織學評價。我們通過顯微鏡觀察，大體觀察肌腱的粘連情況，根據瘢痕量來評價膠原纖維的重塑的程度。通過實時PCR檢測microRNA的表達和通過western blotting來檢測蛋白表達。
　　結果:
　　根據肌腱粘連的評價標準，發(fā)現(xiàn)TSA組比對照組粘連形成少。兩組中均未觀察到肌腱斷裂或局部感染的情況。TSA組中肌腱組織中的膠原纖維的含量降低，與對照組相比有顯著的統(tǒng)計學差異，P

7、=0.0004。在TSA組中在修復肌腱組織中進行檢測miRNA的檢測包括的miR-155，miR-29b，miR-21，miR-133B和let7的表達，僅觀察到miR-29b的表達比對照組有增高，P＜0.0001，有顯著的統(tǒng)計學差異。western blotting來檢測TSA組中TGF-β1和p-Smad3蛋白的表達低于對照組。
　　結論:在大鼠粘連模型中使用TSA可能是防止肌腱粘連的有效方法。
　　第二部分丹參酮ⅡA治

8、療肌腱粘連的臨床研究
　　背景:
　　手外傷容易造成術后掌指關節(jié)粘連和關節(jié)活動受限。特別是創(chuàng)傷術后掌指關節(jié)僵硬的患者，由于掌指關節(jié)的活動度對手指功能影響較大，所以如何恢復手部掌指粘連患者術后手部功能及提高生活質量具有重要意義。2015年9月～2016年3月，我們對80例掌指關節(jié)粘連的病人進行臨床研究，隨機雙盲分成兩組?，F(xiàn)通過回顧分析患者臨床資料，討論丹參酮ⅡA(TSA)防治掌指關節(jié)粘連的臨床療效。
　　目的:
　

9、　探討丹參防治創(chuàng)傷后掌指關節(jié)粘連的臨床療效。
　　方法:
　　2015年9月～2016年3月，對80例掌指關節(jié)粘連的病人進行研究。隨機雙盲分成兩組，TSA組40例和空白組40例。男58例，女22例;年齡20～55歲，平均38歲。其中拇指掌指關節(jié)16例，示指24例，環(huán)指22例，中指11例，小指7例。致傷原因:機器傷33例，運動傷21例，車禍傷17例，刀砍傷9例。治療前、治療后3個月和6個月進行影像學評估，功能評定采用手部關節(jié)活

10、動度TAM系統(tǒng)評價法(total active movement，TAM)，日常生活手功能評定采用Michigan手功能評價(Michigan Hand Outcome Questionnaire，MHQ)，評分數(shù)據采用獨立樣本t檢驗。
　　結果:
　　患者術后切口均Ⅰ期愈合，術后均無內固定松動、斷裂，骨折不愈合等并發(fā)癥?；颊呔@隨訪，隨訪6個月時TAM評分丹參組優(yōu)27例，良10例，可3例，差0例，優(yōu)良率93％;空白組優(yōu)15

11、例，良16例，可9例，差0例，優(yōu)良率78％，組間比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);MHQ評分丹參組60.0±14.2分，空白組50.1±15.7分。組間比較差異有統(tǒng)計學意義(t=2.96，P＜0.05)。
　　結論:
　　運用丹參酮ⅡA可以減少術后掌指關節(jié)粘連程度，臨床療效滿意。
　　第三部分丹參酮ⅡA聯(lián)合Swanson人工關節(jié)置換治療嚴重掌指關節(jié)粘連的初期療效研究
　　Swanson人工關節(jié)最初并用于近端指

12、間關節(jié)(proximal interphalangeal joint，PIP)和掌指關節(jié)(metacarpophalangeal joint，MCP)的關節(jié)置換。既往研究主要集中在Swanson人工關節(jié)置換治療類風濕MCP關節(jié)的臨床療效[10-12]。對于創(chuàng)傷后掌指關節(jié)僵硬患者的治療缺乏系統(tǒng)的臨床研究?？紤]到目前創(chuàng)傷后重度掌指關節(jié)粘連及僵硬的患者臨床療效不佳，我們選擇使用丹參酮ⅡA聯(lián)合Swanson人工關節(jié)置換來解決這個問題。評估其近期

13、臨床療效和患者的主觀評價。
　　目的:
　　探討丹參酮ⅡA聯(lián)合Swanson人工關節(jié)置治療創(chuàng)傷后重度掌指關節(jié)粘連及僵硬患者的初期療效。
　　方法:
　　從2014年9月至2015年7月在就診的屬于創(chuàng)傷后重度掌指關節(jié)粘連及僵硬患者，使用丹參酮ⅡA聯(lián)合Swanson人工關節(jié)置換治療掌指關節(jié)嚴重粘連僵硬患者的回顧性研究。其中男3例，女1例。示指為2例，中指為1例，同時涉及示指和中指1例。掌指關節(jié)離斷3人，掌指關機擠壓傷

14、1人。患者平均年齡為52.15±2.6歲（范圍41歲～67歲）。數(shù)據統(tǒng)計包括術前和術后6個月的評分（握力，關節(jié)活動范圍，Sollerman手功能測定和Michigan手功能評價(Michigan Hand OutcomeQuestionnaire，MHQ)”。
　　結果:
　　隨訪時間為術后6個月。握力較術前顯著增加（術前4.2±2.2公斤，術后6.7±2.8公斤，P=0.027）。關節(jié)運動度范圍已顯著增加（術前24.6±9

15、.0度，術后47.0±10.7度，P＜0.001）。Sollerman評分顯示前和操作后，無統(tǒng)計學顯著差異。MHQ總得分較術前顯著增加（術前50±15，術后57±15，P=0.002）。功能方面，日常生活，外觀和滿病人滿意度等術后評分也顯著增加了。然而日常工作和疼痛的術后評分沒有改善。所有患者對術后外觀，自身滿意度改善。
　　結論:
　　丹參酮ⅡA聯(lián)合Swanson人工關節(jié)置換可明顯改善掌指關節(jié)僵硬患者的運動范圍。患者手部美