丹參酮ⅡA對兔纖維環(huán)細胞保護作用的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 考察丹參酮ⅡA(TSⅡA)對白細胞介素-1β(IL-1β)誘導的兔纖維環(huán)細胞能量代謝障礙、細胞外基質(Ⅰ、Ⅱ型膠原和聚集蛋白聚糖)代謝障礙以及纖維環(huán)細胞凋亡的保護作用。
　　 方法：
　　 藻酸鹽串珠立體培養(yǎng)兔纖維環(huán)細胞，將細胞分為7組，在培養(yǎng)過程中加入不同濃度的藥物：A組為空白對照不加入藥物，B組加入4μg/ml TSⅡA，C組加入10ng/ml IL-1β，D～G組在給予10ng/ml IL-1

2、β同時分別加入0.5、1、2和4μg/ml TSⅡA。于培養(yǎng)3 天后行Na+-K+-ATP 酶活性檢測、琥珀酸脫氫酶活性檢測、MTT法細胞增殖情況檢測以及細胞凋亡的流式細胞儀檢測，RT-PCR檢測Ⅰ、Ⅱ型膠原和聚集蛋白聚糖(Aggrecan)的mRNA表達情況。
　　 結果：
　　 G組Na+-K+-ATP 酶活性(3.23±0.28 U/mgprot)較C組(1.118±0.15U/mgprot)
　　 明顯增

3、高(P＜0.01)，與A組接近(3.57±0.15U/mgprot，P＞0.05)。G組琥珀酸脫氫酶活性(12.48±0.97U/mgprot)較C組(3.03±0.60 U/mgprot)明顯增高(P＜0.01)，與A組接近(14.24±1.56 U/mgprot，P＞0.05)。G組MTT 試驗吸光度(0.77±0.06)較C組(0.31±0.07)明顯增高(P＜0.01)，隨著TSⅡA 濃度的升高，D～G組吸光度隨著TSⅡA 上升

4、而上升。G組細胞死亡細胞比例和凋亡細胞比例分別為21.08±1.46％和8.99±0.33％，均顯著低C組(43.11±2.7，P＜0.01和11.71±0.32，P＜0.01)。G組Ⅰ型膠原mRNA表達水平(1.23±0.22)較C組明顯增高(0.71±0.14，P＜0.01)，與A組接近(1.35±0.15，P＞0.05)。G組Ⅱ型膠原mRNA表達水平(0.95±0.07)較C組顯著增高(0.52±0.16，P＜0.01)，較A組略

5、高(0.82±0.21，P＞0.05)，無統(tǒng)計學意義，與B組相當(1.02±0.21，P＞0.05)。G組Aggrecan mRNA表達水平(1.20±0.21)明顯高于C組(0.83±0.08，P＜0.01)，略高于A組(1.16±0.13，P＞0.05)，與B組相當(1.26±0.08，P＞0.05)。
　　 結論：
　　 TSⅡA能夠減輕IL-1β對纖維環(huán)細胞能量代謝的抑制作用，從而改善纖維環(huán)細胞的增殖、死亡及凋亡