重組腺病毒介導(dǎo)的ING4對(duì)人MCF-7乳腺癌細(xì)胞的增殖抑制及化療增敏作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究重組腺病毒介導(dǎo)的ING-4（Inhibitor of tumor growth factor4）基因感染人MCF-7乳腺癌細(xì)胞后對(duì)后者所起的生長(zhǎng)抑制作用及化療增敏作用。
　　方法：將搭載有ING-4基因的重組腺病毒載體Ad-ING4感染人MCF-7乳腺癌細(xì)胞，用熒光顯微鏡觀察感染后的MCF-7細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；RT-PCR和Western-Blot法檢測(cè)ING-4基因在MCF-7細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)；CCK法分別測(cè)定ADM、

2、5-Fu、CTX對(duì)病毒感染前后的MCF-7乳腺癌細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度IC50，以觀察其化療藥物增敏現(xiàn)象。用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè) ING-4基因?qū)?MCF-7細(xì)胞的促凋亡作用；半定量RT-PCR法檢測(cè)ING-4基因表達(dá)對(duì)MCF-7細(xì)胞中相關(guān)凋亡基因表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：搭載有ING-4基因的重組腺病毒載體Ad-ING4成功感染人MCF-7乳腺癌細(xì)胞，并且隨著感染作用時(shí)間的延長(zhǎng)，于熒光顯微鏡下可見 Ad-ING4作用下的MCF-7乳腺癌細(xì)

3、胞變圓、脫落、皺縮、聚集等現(xiàn)象愈加明顯，細(xì)胞貼壁數(shù)量明顯減少；重組腺病毒載體感染MCF-7細(xì)胞后 ING-4成功轉(zhuǎn)染入細(xì)胞內(nèi)，RT-PCR法檢測(cè)出其于 MCF-7細(xì)胞內(nèi)獲得表達(dá)；蛋白印跡法表明在感染后的MCF-7細(xì)胞內(nèi)存在ING-4基因相關(guān)蛋白的表達(dá)；CCK-8試驗(yàn)表明在有ING-4基因表達(dá)的情況下，MCF-7細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性有所增強(qiáng)；Ad-ING4與化療藥物聯(lián)合使用時(shí)對(duì)MCF-7細(xì)胞的增殖抑制作用更為明顯；RT-PCR檢測(cè)表明A