特發(fā)性中樞性性早熟女童雌激素受體β基因RsaⅠ和AluⅠ多態(tài)性的研究.pdf

1、1.背景：
　　性早熟是指女童在8歲前、男童在9歲前出現(xiàn)第二性征的發(fā)育。根據(jù)發(fā)病機制可分為中樞性性早熟(central precocious puberty,CPP)、外周性性早熟（peripheral precocious puberty，PPP）及部分性早熟。中樞性性早熟中無器質(zhì)性病變的則稱之特發(fā)性中樞性性早熟(idiopathic central precocious puberty,ICPP)，ICPP主要因下丘腦-垂體-

2、性腺軸功能的提前釋放(Hypothalamic-pituitary-gonadal axis，HPGA)而使兒童出現(xiàn)乳腺發(fā)育、月經(jīng)早潮、骨骺提前閉合，身材矮小等表現(xiàn)。隨著生活水平的提高，飲食習慣和周圍環(huán)境的改變，性早熟的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，多見于女童。性早熟的病因和發(fā)病機制復(fù)雜多樣，因器質(zhì)性疾病導(dǎo)致性早熟較少，多數(shù)因內(nèi)分泌功能紊亂引起。最近研究指出環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(environmental endocrine disruptors

3、，EEDs)能夠通過影響HPGA的啟動和功能，引起機體內(nèi)分泌系統(tǒng)功能紊亂而導(dǎo)致性早熟。
　　在基因突變和基因多態(tài)性研究的基礎(chǔ)上探索性早熟的病因越來越受到關(guān)注。但雌激素受體β基因多態(tài)性與性早熟的相關(guān)報道較少。本研究擬檢測ICPP女童雌激素受體β基因RsaⅠ、AluⅠ基因多態(tài)性，探討其與中樞性性早熟發(fā)生的關(guān)系。
　　2.目的：
　　通過觀察ICPP女童ERβ基因RsaⅠ、AluⅠ多態(tài)性，探討與中樞性性早熟發(fā)生的關(guān)系，為其分

4、子遺傳基礎(chǔ)提供依據(jù)。
　　3.方法：
　　3.1 研究對象
　　從2013年1月到2014年08月在深圳市婦幼保健院兒科內(nèi)分泌門診及住院部的病人中選取100例ICPP女童。她們經(jīng)體格檢查、臨床表現(xiàn)和影像學檢查，再經(jīng)過GnRH激發(fā)試驗均符合ICPP的診斷標準。所有的研究對象初次就診的年齡在4-10.5歲，平均為(6.690±1.580)歲。
　　在同一時期隨機選擇在本院體檢均健康的100例女童作為對照組，她們均生長

5、發(fā)育正常，無相關(guān)腫瘤及慢性消耗性疾病。其就診年齡在3.83-10.00歲，平均為(5.81±1.12)歲，ICPP組與對照組間的年齡差異無統(tǒng)計學意義(t=0.87，P＞0.05)。
　　3.2 實驗方法
　　(1)收集ICPP女童和對照組女孩的外周靜脈血3ml，以待檢測ERβRsaⅠ、AluⅠ基因多態(tài)性。
　　(2)通過PCR-DNA測序的方法，對ICPP女童和正常健康組女童的ERβRsaⅠ和AluⅠ基因多態(tài)性的長度進

6、行檢測，進一步發(fā)現(xiàn)ERβ基因RsaⅠ、AluⅠ的基因型分布和R等位基因及A等位基因的基因頻率。
　　(3)采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學的數(shù)據(jù)分析，分別統(tǒng)計兩組基因型頻率和等位基因頻率的分布情況，組間差異用x2檢驗，計算OR值和95％CI，以P＜0.05有統(tǒng)計學意義。
　　4.結(jié)果：
　　4.1 RsaⅠ基因多態(tài)性分析RsaⅠ基因型及R等位基因頻率在兩組中的分布差異均有統(tǒng)計學意義(x2=5.960，P=0.045;

7、x2=4.771，P=0.029)，ICPP組的R等位基因頻率是41.50％，高于對照組的30.00％，OR值是1.579(95％CI1.047～2.382，P＜0.05)，ICPP組和對照組在基因型分布上分別是Rr與rr基因型所占比例較高，均為51％和48％。
　　4.2 AluⅠ基因多態(tài)性分析AluⅠ基因型及A等位基因頻率在兩組中分布差異均無統(tǒng)計學意義(x2=2.889，P=0.236;x2=2.749，P=0.097)，A等

8、位基因頻率在ICPP組中是18.5％，在對照組中則為12.5％,OR值是1.589(95％CI0.916～2.755，P＞0.05)，基因型分布上ICPP組和對照組中均是aa基因型所占比例較高，各占66％和76％。
　　4.3 RsaⅠ和AluⅠ基因多態(tài)性聯(lián)合分析9種單體型分布經(jīng)卡方檢驗在兩組間差異有顯著統(tǒng)計學意義(2=15.821，P=0.045)，其中ICPP組Rraa基因型構(gòu)成比(39％)高于對照組構(gòu)成比(31％)，而rra